生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2004年
2期
269-273
,共5页
朱浩君%梁运祥%周俊初%郑应华
硃浩君%樑運祥%週俊初%鄭應華
주호군%량운상%주준초%정응화
阿维菌素%支链α-酮酸脱氢酶基因%基因中断
阿維菌素%支鏈α-酮痠脫氫酶基因%基因中斷
아유균소%지련α-동산탈경매기인%기인중단
以阿维菌B组分菌株Streptomyces avermitilis Bjbm0006为出发菌株,用PCR的方法构建bkdAB基因簇(Branched-chain α-keto acid dehydrogenase gene AB) 的基因置换质粒pHJ5821 (pHZ1358∷bkdAB&erm),并对其进行基因中断,得到重组菌株Bjbm5821.Bjbm5821的发酵产物经HPLC检测发现,除了产生B1a和B2a外,还产生一种原菌株没有的新组分,3个组分的总含量只有出发菌株Bjbm0006的25%.结果表明bkdAB的中断不仅部分阻断了阿维菌素的合成,还阻断了阿维菌素b组分的合成,可以推测bkdAB的产物在阿维菌素合成途径中主要承担了α酮基异戊酸脱氢酶 (α-ketoisovaleric acid dehydrogenase) 角色.
以阿維菌B組分菌株Streptomyces avermitilis Bjbm0006為齣髮菌株,用PCR的方法構建bkdAB基因簇(Branched-chain α-keto acid dehydrogenase gene AB) 的基因置換質粒pHJ5821 (pHZ1358∷bkdAB&erm),併對其進行基因中斷,得到重組菌株Bjbm5821.Bjbm5821的髮酵產物經HPLC檢測髮現,除瞭產生B1a和B2a外,還產生一種原菌株沒有的新組分,3箇組分的總含量隻有齣髮菌株Bjbm0006的25%.結果錶明bkdAB的中斷不僅部分阻斷瞭阿維菌素的閤成,還阻斷瞭阿維菌素b組分的閤成,可以推測bkdAB的產物在阿維菌素閤成途徑中主要承擔瞭α酮基異戊痠脫氫酶 (α-ketoisovaleric acid dehydrogenase) 角色.
이아유균B조분균주Streptomyces avermitilis Bjbm0006위출발균주,용PCR적방법구건bkdAB기인족(Branched-chain α-keto acid dehydrogenase gene AB) 적기인치환질립pHJ5821 (pHZ1358∷bkdAB&erm),병대기진행기인중단,득도중조균주Bjbm5821.Bjbm5821적발효산물경HPLC검측발현,제료산생B1a화B2a외,환산생일충원균주몰유적신조분,3개조분적총함량지유출발균주Bjbm0006적25%.결과표명bkdAB적중단불부부분조단료아유균소적합성,환조단료아유균소b조분적합성,가이추측bkdAB적산물재아유균소합성도경중주요승담료α동기이무산탈경매 (α-ketoisovaleric acid dehydrogenase) 각색.
