中国修复重建外科杂志
中國脩複重建外科雜誌
중국수복중건외과잡지
CHINESE JOURNAL OF REPARATIVE AND RECONSTRUCTIVE SURGERY
2005年
4期
287-290
,共4页
周立义%洪光祥%王发斌%黄启顺%翁雨雄
週立義%洪光祥%王髮斌%黃啟順%翁雨雄
주립의%홍광상%왕발빈%황계순%옹우웅
骨髓基质细胞%细胞培养%神经活性物质
骨髓基質細胞%細胞培養%神經活性物質
골수기질세포%세포배양%신경활성물질
目的分离纯化骨髓基质细胞(marrow stromal cells,MSCs)胞浆中神经营养蛋白,并验证其神经活性作用. 方法自小鼠股骨分离培养 MSCs,超声粉碎后离心并收集其上清液,超滤浓缩后收集大于10 ku浓缩蛋白液.Sephadex G-100层析、高效液相色谱分析(high performance liquid chromatography,HPLC)和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶不连续电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electropheresis,SDS-PAGE)等技术分离神经活性蛋白,培养脊髓运动神经元,通过MTT法及观察细胞形态来验证其神经活性作用. 结果 MSCs胞浆上清液经Sephadex G-100层析后发现,Ⅱ峰对神经细胞生长有促进作用.对Ⅱ峰行HPLC分析发现,A峰对神经细胞生长有明显促进作用.对A峰行SDS-PAGE分析,提示为单一蛋白带,分子量为13 ku. 结论 MSCs胞浆中含有神经营养蛋白,其分子量为13 ku.
目的分離純化骨髓基質細胞(marrow stromal cells,MSCs)胞漿中神經營養蛋白,併驗證其神經活性作用. 方法自小鼠股骨分離培養 MSCs,超聲粉碎後離心併收集其上清液,超濾濃縮後收集大于10 ku濃縮蛋白液.Sephadex G-100層析、高效液相色譜分析(high performance liquid chromatography,HPLC)和十二烷基硫痠鈉-聚丙烯酰胺凝膠不連續電泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electropheresis,SDS-PAGE)等技術分離神經活性蛋白,培養脊髓運動神經元,通過MTT法及觀察細胞形態來驗證其神經活性作用. 結果 MSCs胞漿上清液經Sephadex G-100層析後髮現,Ⅱ峰對神經細胞生長有促進作用.對Ⅱ峰行HPLC分析髮現,A峰對神經細胞生長有明顯促進作用.對A峰行SDS-PAGE分析,提示為單一蛋白帶,分子量為13 ku. 結論 MSCs胞漿中含有神經營養蛋白,其分子量為13 ku.
목적분리순화골수기질세포(marrow stromal cells,MSCs)포장중신경영양단백,병험증기신경활성작용. 방법자소서고골분리배양 MSCs,초성분쇄후리심병수집기상청액,초려농축후수집대우10 ku농축단백액.Sephadex G-100층석、고효액상색보분석(high performance liquid chromatography,HPLC)화십이완기류산납-취병희선알응효불련속전영(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electropheresis,SDS-PAGE)등기술분리신경활성단백,배양척수운동신경원,통과MTT법급관찰세포형태래험증기신경활성작용. 결과 MSCs포장상청액경Sephadex G-100층석후발현,Ⅱ봉대신경세포생장유촉진작용.대Ⅱ봉행HPLC분석발현,A봉대신경세포생장유명현촉진작용.대A봉행SDS-PAGE분석,제시위단일단백대,분자량위13 ku. 결론 MSCs포장중함유신경영양단백,기분자량위13 ku.
