山东医药
山東醫藥
산동의약
SHANDONG MEDICAL JOURNAL
2006年
36期
11-12
,共2页
邬跃刚%曹政%吴相柏%魏亚元%霍磊%陶凯雄
鄔躍剛%曹政%吳相柏%魏亞元%霍磊%陶凱雄
오약강%조정%오상백%위아원%곽뢰%도개웅
表皮生长因子受体%小分子干扰RNA%短发卡状RNA%质粒载体
錶皮生長因子受體%小分子榦擾RNA%短髮卡狀RNA%質粒載體
표피생장인자수체%소분자간우RNA%단발잡상RNA%질립재체
目的 构建靶向表皮生长因子受体(EGFR)的短发卡状RNA(shRNA)质粒表达载体并进行鉴定.方法 设计两个小分子干扰RNA(siRNA)序列,体外合成DNA模板引物,与Pgenesil-1质粒构建成编码shRNA的表达载体,进行酶切鉴定和测序,再转染人大肠癌LoVo细胞,进行荧光摄像和G418抗性筛选.结果 构建的质粒表达载体完全符合设计要求,转染成功的细胞在荧光显微镜下显示为绿色,G418可以筛选出阳性克隆.结论 成功构建了编码EGFR-shRNA的质粒表达载体,并可以进行稳定筛选.
目的 構建靶嚮錶皮生長因子受體(EGFR)的短髮卡狀RNA(shRNA)質粒錶達載體併進行鑒定.方法 設計兩箇小分子榦擾RNA(siRNA)序列,體外閤成DNA模闆引物,與Pgenesil-1質粒構建成編碼shRNA的錶達載體,進行酶切鑒定和測序,再轉染人大腸癌LoVo細胞,進行熒光攝像和G418抗性篩選.結果 構建的質粒錶達載體完全符閤設計要求,轉染成功的細胞在熒光顯微鏡下顯示為綠色,G418可以篩選齣暘性剋隆.結論 成功構建瞭編碼EGFR-shRNA的質粒錶達載體,併可以進行穩定篩選.
목적 구건파향표피생장인자수체(EGFR)적단발잡상RNA(shRNA)질립표체재체병진행감정.방법 설계량개소분자간우RNA(siRNA)서렬,체외합성DNA모판인물,여Pgenesil-1질립구건성편마shRNA적표체재체,진행매절감정화측서,재전염인대장암LoVo세포,진행형광섭상화G418항성사선.결과 구건적질립표체재체완전부합설계요구,전염성공적세포재형광현미경하현시위록색,G418가이사선출양성극륭.결론 성공구건료편마EGFR-shRNA적질립표체재체,병가이진행은정사선.
