西北农林科技大学学报(自然科学版)
西北農林科技大學學報(自然科學版)
서북농림과기대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF NORTHWEST SCI-TECH UNIVERSITY OF AGRICULTURE AND FORESTRY
2007年
2期
83-87
,共5页
薄慧杰%卢长明%吴刚%武玉花%肖玲%白延红%陈耀锋
薄慧傑%盧長明%吳剛%武玉花%肖玲%白延紅%陳耀鋒
박혜걸%로장명%오강%무옥화%초령%백연홍%진요봉
抗除草剂基因bar%原核表达%蛋白纯化%转基因产品检测
抗除草劑基因bar%原覈錶達%蛋白純化%轉基因產品檢測
항제초제기인bar%원핵표체%단백순화%전기인산품검측
通过PCR扩增,从pCAMBIA1300-bar质粒中获得bar基因编码区全长,经酶切鉴定和测序后证实,bar基因分离成功.用BamHⅠ和HindⅢ酶切,将bar基因与原核表达载体pET28a(+)连接,构建成重组质粒pET28 bar.将重组质粒pET28 bar转化大肠杆菌菌株BL21(DE3)后,获得高效表达.SDS-PAGE电泳分析显示,目的蛋白主要以包涵体形式存在,蛋白质分子量约为27 ku.将包涵体离心、洗涤和纯化后,得到高纯度的目的蛋白.该蛋白可以替代植物外源蛋白进行转bar基因产品的食用安全性检测,也可用于转bar基因产品ELISA检测的抗体制备.
通過PCR擴增,從pCAMBIA1300-bar質粒中穫得bar基因編碼區全長,經酶切鑒定和測序後證實,bar基因分離成功.用BamHⅠ和HindⅢ酶切,將bar基因與原覈錶達載體pET28a(+)連接,構建成重組質粒pET28 bar.將重組質粒pET28 bar轉化大腸桿菌菌株BL21(DE3)後,穫得高效錶達.SDS-PAGE電泳分析顯示,目的蛋白主要以包涵體形式存在,蛋白質分子量約為27 ku.將包涵體離心、洗滌和純化後,得到高純度的目的蛋白.該蛋白可以替代植物外源蛋白進行轉bar基因產品的食用安全性檢測,也可用于轉bar基因產品ELISA檢測的抗體製備.
통과PCR확증,종pCAMBIA1300-bar질립중획득bar기인편마구전장,경매절감정화측서후증실,bar기인분리성공.용BamHⅠ화HindⅢ매절,장bar기인여원핵표체재체pET28a(+)련접,구건성중조질립pET28 bar.장중조질립pET28 bar전화대장간균균주BL21(DE3)후,획득고효표체.SDS-PAGE전영분석현시,목적단백주요이포함체형식존재,단백질분자량약위27 ku.장포함체리심、세조화순화후,득도고순도적목적단백.해단백가이체대식물외원단백진행전bar기인산품적식용안전성검측,야가용우전bar기인산품ELISA검측적항체제비.
