中国微侵袭神经外科杂志
中國微侵襲神經外科雜誌
중국미침습신경외과잡지
CHINESE JOURNAL OF MINIMALLY INVASIVE NEUROSURGERY
2007年
3期
125-128
,共4页
修俊刚%柯以铨%杨志军%代广辉%陈中灿%姜晓丹%邹雨汐
脩俊剛%柯以銓%楊誌軍%代廣輝%陳中燦%薑曉丹%鄒雨汐
수준강%가이전%양지군%대엄휘%진중찬%강효단%추우석
骨髓基质细胞%神经干细胞%电子自旋共振谱学%聚赖氨酸%生物学标记
骨髓基質細胞%神經榦細胞%電子自鏇共振譜學%聚賴氨痠%生物學標記
골수기질세포%신경간세포%전자자선공진보학%취뢰안산%생물학표기
目的 初步探索利用菲立磁(FE)和转染试剂多聚赖氨酸(PLL)体外磁性标记兔骨髓基质细胞(BMSC)这一方法的可行性,并确定其标记BMSC的最佳浓度.方法 无菌条件下行股骨取髓,采用梯度密度离心法分离获取兔BMSC,体外培养、诱导分化为神经干细胞(NSC),使用不同浓度(5、12.5、25、37.5 μg/ml)的FE-PLL标记BMSC.采用普鲁士蓝染色、CCK-8法、流式细胞仪、透射电镜、免疫细胞染色等方法,检测FE-PLL标记兔BMSC的效率及其对细胞生长、分化、凋亡的影响.结果 FE可以高效率标记BMSC,被标记的细胞在显微镜下呈淡黄或深黄,颜色深浅与所加FE的剂量呈正相关.流式细胞仪结果显示:5、12.5、25 μg/ml各组FE对细胞无不良影响,而37.5 μg/ml组凋亡细胞明显增加.CCK-8测定的生长曲线表明:除37.5 μg/ml组外,其他各组细胞之间差异无统计学意义.普鲁士蓝染色显示:各组FE-pLL标记BMSC胞质内均可见到细小的蓝色铁颗粒.电镜结果显示:各组FE-PLL标记的BMSC胞质内含有许多包裹铁颗粒的囊泡,其含铁囊泡的数量依FE浓度增加而增加.结论 FE可以用来体外标记兔BMSC;其标记效率随FE浓度增加而增高,最佳浓度为25 μg/ml.
目的 初步探索利用菲立磁(FE)和轉染試劑多聚賴氨痠(PLL)體外磁性標記兔骨髓基質細胞(BMSC)這一方法的可行性,併確定其標記BMSC的最佳濃度.方法 無菌條件下行股骨取髓,採用梯度密度離心法分離穫取兔BMSC,體外培養、誘導分化為神經榦細胞(NSC),使用不同濃度(5、12.5、25、37.5 μg/ml)的FE-PLL標記BMSC.採用普魯士藍染色、CCK-8法、流式細胞儀、透射電鏡、免疫細胞染色等方法,檢測FE-PLL標記兔BMSC的效率及其對細胞生長、分化、凋亡的影響.結果 FE可以高效率標記BMSC,被標記的細胞在顯微鏡下呈淡黃或深黃,顏色深淺與所加FE的劑量呈正相關.流式細胞儀結果顯示:5、12.5、25 μg/ml各組FE對細胞無不良影響,而37.5 μg/ml組凋亡細胞明顯增加.CCK-8測定的生長麯線錶明:除37.5 μg/ml組外,其他各組細胞之間差異無統計學意義.普魯士藍染色顯示:各組FE-pLL標記BMSC胞質內均可見到細小的藍色鐵顆粒.電鏡結果顯示:各組FE-PLL標記的BMSC胞質內含有許多包裹鐵顆粒的囊泡,其含鐵囊泡的數量依FE濃度增加而增加.結論 FE可以用來體外標記兔BMSC;其標記效率隨FE濃度增加而增高,最佳濃度為25 μg/ml.
목적 초보탐색이용비립자(FE)화전염시제다취뢰안산(PLL)체외자성표기토골수기질세포(BMSC)저일방법적가행성,병학정기표기BMSC적최가농도.방법 무균조건하행고골취수,채용제도밀도리심법분리획취토BMSC,체외배양、유도분화위신경간세포(NSC),사용불동농도(5、12.5、25、37.5 μg/ml)적FE-PLL표기BMSC.채용보로사람염색、CCK-8법、류식세포의、투사전경、면역세포염색등방법,검측FE-PLL표기토BMSC적효솔급기대세포생장、분화、조망적영향.결과 FE가이고효솔표기BMSC,피표기적세포재현미경하정담황혹심황,안색심천여소가FE적제량정정상관.류식세포의결과현시:5、12.5、25 μg/ml각조FE대세포무불량영향,이37.5 μg/ml조조망세포명현증가.CCK-8측정적생장곡선표명:제37.5 μg/ml조외,기타각조세포지간차이무통계학의의.보로사람염색현시:각조FE-pLL표기BMSC포질내균가견도세소적람색철과립.전경결과현시:각조FE-PLL표기적BMSC포질내함유허다포과철과립적낭포,기함철낭포적수량의FE농도증가이증가.결론 FE가이용래체외표기토BMSC;기표기효솔수FE농도증가이증고,최가농도위25 μg/ml.
