华中科技大学学报（医学版）
華中科技大學學報（醫學版）
화중과기대학학보（의학판）
ACTA UNIVERSITATIS MEDICINAE TONGJI
2009年
4期
441-445
,共5页
活性氧%缺氧%肺动脉平滑肌细胞%细胞凋亡%Bcl-2蛋白%Bax蛋白
活性氧%缺氧%肺動脈平滑肌細胞%細胞凋亡%Bcl-2蛋白%Bax蛋白
활성양%결양%폐동맥평활기세포%세포조망%Bcl-2단백%Bax단백
目的 研究和探讨缺氧状态下大鼠肺动脉平滑肌细胞(pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMCs)内活性氧(reactive oxygen species,ROs)对细胞凋亡的影响及其调控机制.方法 原代培养正常大鼠PASMCs,选用第2～4代用于实验.分别在常氧及低氧条件下使用ROS清除剂Tiron进行分组干预.通过四唑硝基蓝(NBT)还原法、2,7-二氢二氯荧光黄双乙酸钠(DCFH-DA)荧光探针检测细胞内ROS水平,原位细胞凋亡检测法(TUNEL)检测细胞凋亡,免疫细胞化学法检测Bcl-2和Bax蛋白表达.结果 ①缺氧组细胞ROS水平[NBT:(0.214±0.024),DCFH-DA:(39.33±3.27)]明显高于对照组[NBT:(0.114±0.017),DCFH-DA:(15.84±2.86)](均P<0.01);②缺氧组细胞凋亡指数(2.42±0.74)显著低于对照组(4.50±0.45)(P<0.01),Tiron+缺氧组细胞的凋亡指数(5.75±0.94)与缺氧组比较则明显升高(P<0.01);③与对照组[Bcl-2:(0.098±0.017),Bax:(0.210±0.031),Bcl-2/Bax:(0.465±0.021)]相比较,缺氧组Bcl-2蛋白表达(0.141±0.024)增强(P<0.05),Bax蛋白表达(0.074±0.020)减弱(P<0.05),Bcl-2/Bax比值(1.973±0.283)升高(P<0.01);④和缺氧组比较,缺氧+Tiron组Bcl-2蛋白表达(0.124±0.018)降低(P<0.05),同时Bax蛋白表达(0.182±0.019)增强(P<0.05),Bcl-2/Bax比值降低(0.678±0.071)(P<0.01).结论 缺氧状态时大鼠PAsMCs内ROS生成增多,ROS可通过促进Bcl-2/Bax蛋白表达比值升高来抑制PASMCs凋亡,从而在缺氧性肺动脉重建的发病机制中发挥重要作用.
目的 研究和探討缺氧狀態下大鼠肺動脈平滑肌細胞(pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMCs)內活性氧(reactive oxygen species,ROs)對細胞凋亡的影響及其調控機製.方法 原代培養正常大鼠PASMCs,選用第2～4代用于實驗.分彆在常氧及低氧條件下使用ROS清除劑Tiron進行分組榦預.通過四唑硝基藍(NBT)還原法、2,7-二氫二氯熒光黃雙乙痠鈉(DCFH-DA)熒光探針檢測細胞內ROS水平,原位細胞凋亡檢測法(TUNEL)檢測細胞凋亡,免疫細胞化學法檢測Bcl-2和Bax蛋白錶達.結果 ①缺氧組細胞ROS水平[NBT:(0.214±0.024),DCFH-DA:(39.33±3.27)]明顯高于對照組[NBT:(0.114±0.017),DCFH-DA:(15.84±2.86)](均P<0.01);②缺氧組細胞凋亡指數(2.42±0.74)顯著低于對照組(4.50±0.45)(P<0.01),Tiron+缺氧組細胞的凋亡指數(5.75±0.94)與缺氧組比較則明顯升高(P<0.01);③與對照組[Bcl-2:(0.098±0.017),Bax:(0.210±0.031),Bcl-2/Bax:(0.465±0.021)]相比較,缺氧組Bcl-2蛋白錶達(0.141±0.024)增彊(P<0.05),Bax蛋白錶達(0.074±0.020)減弱(P<0.05),Bcl-2/Bax比值(1.973±0.283)升高(P<0.01);④和缺氧組比較,缺氧+Tiron組Bcl-2蛋白錶達(0.124±0.018)降低(P<0.05),同時Bax蛋白錶達(0.182±0.019)增彊(P<0.05),Bcl-2/Bax比值降低(0.678±0.071)(P<0.01).結論 缺氧狀態時大鼠PAsMCs內ROS生成增多,ROS可通過促進Bcl-2/Bax蛋白錶達比值升高來抑製PASMCs凋亡,從而在缺氧性肺動脈重建的髮病機製中髮揮重要作用.
목적 연구화탐토결양상태하대서폐동맥평활기세포(pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMCs)내활성양(reactive oxygen species,ROs)대세포조망적영향급기조공궤제.방법 원대배양정상대서PASMCs,선용제2～4대용우실험.분별재상양급저양조건하사용ROS청제제Tiron진행분조간예.통과사서초기람(NBT)환원법、2,7-이경이록형광황쌍을산납(DCFH-DA)형광탐침검측세포내ROS수평,원위세포조망검측법(TUNEL)검측세포조망,면역세포화학법검측Bcl-2화Bax단백표체.결과 ①결양조세포ROS수평[NBT:(0.214±0.024),DCFH-DA:(39.33±3.27)]명현고우대조조[NBT:(0.114±0.017),DCFH-DA:(15.84±2.86)](균P<0.01);②결양조세포조망지수(2.42±0.74)현저저우대조조(4.50±0.45)(P<0.01),Tiron+결양조세포적조망지수(5.75±0.94)여결양조비교칙명현승고(P<0.01);③여대조조[Bcl-2:(0.098±0.017),Bax:(0.210±0.031),Bcl-2/Bax:(0.465±0.021)]상비교,결양조Bcl-2단백표체(0.141±0.024)증강(P<0.05),Bax단백표체(0.074±0.020)감약(P<0.05),Bcl-2/Bax비치(1.973±0.283)승고(P<0.01);④화결양조비교,결양+Tiron조Bcl-2단백표체(0.124±0.018)강저(P<0.05),동시Bax단백표체(0.182±0.019)증강(P<0.05),Bcl-2/Bax비치강저(0.678±0.071)(P<0.01).결론 결양상태시대서PAsMCs내ROS생성증다,ROS가통과촉진Bcl-2/Bax단백표체비치승고래억제PASMCs조망,종이재결양성폐동맥중건적발병궤제중발휘중요작용.
