单纯疱疹病毒1型US12基因siRNA筛选及其对病毒增殖的影响
단순포진병독1형US12기인siRNA사선급기대병독증식적영향
Screening of highly efficient siRNA for silencing US12 gene of HSV-1
  • 万方数据
    中国病理生理杂志 중국병리생리잡지
    CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
    2011年 3期 528-532 ,共5页

    李深%任哲%王巧利%向阳飞%王一飞%胡巢凤%戚仁斌%陆大祥%张庶民%张佩琢

    리심%임철%왕교리%향양비%왕일비%호소봉%척인빈%륙대상%장서민%장패탁

    siRNA%RNA干扰%基因,US12%单纯疱疹病毒1型 siRNA%RNA榦擾%基因,US12%單純皰疹病毒1型
    siRNA%RNA간우%기인,US12%단순포진병독1형
    目的:筛选高效沉默单纯疱疹病毒1型(HSV-1) US12基因的siRNA,研究siRNA沉默US12基因后对HSV-1增殖的影响.方法:构建pEGFP-N1-US12融合表达质粒,设计并化学合成3对靶向US12基因的siRNA,与pEGFP-N1-US12融合表达质粒共转染Vero细胞,流式细胞术筛选高效抑制pEGFP-N1-US12融合蛋白的siRNA,实时荧光定量PCR检测siRNA对细胞内US12 mRNA表达水平的抑制效果,空斑减数实验评价siRNA对HSV-1增殖的抑制效果.结果:共转染实验筛选出高效抑制pEGFP-N1-US12融合蛋白的siRNAS121、siRNAS122及siRNAS123.3对siRNA均能显著降低感染细胞US12 mRNA的表达水平,但空斑减数实验均未发现3对siRNA对HSV-1的增殖有显著抑制效果.结论:成功构建pEGFP-N1-US12融合表达质粒,筛选到高效抑制US12基因表达的3对siRNA,但是对病毒的体外增殖无显著影响,表明US12表达的立即早期蛋白ICP47的功能可能与HSV-1体外增殖无直接相关.
    목적:사선고효침묵단순포진병독1형(HSV-1) US12기인적siRNA,연구siRNA침묵US12기인후대HSV-1증식적영향.방법:구건pEGFP-N1-US12융합표체질립,설계병화학합성3대파향US12기인적siRNA,여pEGFP-N1-US12융합표체질립공전염Vero세포,류식세포술사선고효억제pEGFP-N1-US12융합단백적siRNA,실시형광정량PCR검측siRNA대세포내US12 mRNA표체수평적억제효과,공반감수실험평개siRNA대HSV-1증식적억제효과.결과:공전염실험사선출고효억제pEGFP-N1-US12융합단백적siRNAS121、siRNAS122급siRNAS123.3대siRNA균능현저강저감염세포US12 mRNA적표체수평,단공반감수실험균미발현3대siRNA대HSV-1적증식유현저억제효과.결론:성공구건pEGFP-N1-US12융합표체질립,사선도고효억제US12기인표체적3대siRNA,단시대병독적체외증식무현저영향,표명US12표체적립즉조기단백ICP47적공능가능여HSV-1체외증식무직접상관.
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