CAJ | 학술논문

建立了根癌农杆菌介导的红豆杉细胞遗传转化体系,为红豆杉细胞的遗传改良打下基础.最优转化条件是:菌液光密度A600=0.6,侵染时间25 min,共培养最适温度21℃,共培养时间48 h;最适头孢霉素(Cephamycin,Cef)抑菌浓度为300 mg/L;最优的除菌及筛选方式为:用含100 mg/L头孢霉素的无菌水冲洗共培养后的细胞10s,然后将细胞转至含300 mg/L头孢霉素的抑菌培养基上,两周后转至含150 mg/L卡那霉素(Kanamycin,Kan)或8 mg/L潮霉素(Hygromycin,Hyg)的筛选培养基上筛选.采用小愈伤团法筛选转基因纯系,GUS染色显示,筛选后转化细胞株的阳性细胞占80％以上.
건립료근암농간균개도적홍두삼세포유전전화체계,위홍두삼세포적유전개량타하기출.최우전화조건시:균액광밀도A600=0.6,침염시간25 min,공배양최괄온도21℃,공배양시간48 h;최괄두포매소(Cephamycin,Cef)억균농도위300 mg/L;최우적제균급사선방식위:용함100 mg/L두포매소적무균수충세공배양후적세포10s,연후장세포전지함300 mg/L두포매소적억균배양기상,량주후전지함150 mg/L잡나매소(Kanamycin,Kan)혹8 mg/L조매소(Hygromycin,Hyg)적사선배양기상사선.채용소유상단법사선전기인순계,GUS염색현시,사선후전화세포주적양성세포점80％이상.