6His-VP3融合蛋白的表达、纯化及其捕获细胞中相关蛋白的初步探讨
6His-VP3융합단백적표체、순화급기포획세포중상관단백적초보탐토
Expression and Purification of 6His-VP3 Fusion Protein and Preliminary Research of Its Related Proteins in Tumor Cells
  • 万方数据
    医学分子生物学杂志 의학분자생물학잡지
    FOREIGN MEDICAL SCIENCES
    2007年 2期 112-115 ,共4页

    王阿慧%孙军%毕昊%彭冬君%田俊%狄勇%宗义强%屈伸

    왕아혜%손군%필호%팽동군%전준%적용%종의강%굴신

    凋亡素%VP3融合蛋白%相关蛋白%肿瘤特异性 凋亡素%VP3融閤蛋白%相關蛋白%腫瘤特異性
    조망소%VP3융합단백%상관단백%종류특이성
    目的 研究人肝癌细胞HepG2与人胎肝细胞L-02中与VP3蛋白相互作用的蛋白组分,以探讨VP3特异性诱导肿瘤细胞凋亡的机制.方法 采用PCR方法克隆vp3的DNA片段,将其插入质粒pET-28a(+)构建含6个组氨酸标签6His-VP3融合蛋白的原核表达载体.利用亲和层析技术制备纯化的6His-VP3融合蛋白作为诱饵,分别从肿瘤细胞HepG2及正常细胞L-02的总蛋白中,通过pull-down技术捕获与VP3相互作用的特异性蛋白质组分.结果 获得了高纯度的6His-VP3融合蛋白;以其作为诱饵从HepG2细胞和L-02细胞中捕获到的与VP3作用的相关蛋白质组分存在差异.结论 肿瘤细胞HepG2及正常细胞L-02中,与VP3作用蛋白的差异与其在不同细胞中的生物学行为相对应.
    목적 연구인간암세포HepG2여인태간세포L-02중여VP3단백상호작용적단백조분,이탐토VP3특이성유도종류세포조망적궤제.방법 채용PCR방법극륭vp3적DNA편단,장기삽입질립pET-28a(+)구건함6개조안산표첨6His-VP3융합단백적원핵표체재체.이용친화층석기술제비순화적6His-VP3융합단백작위유이,분별종종류세포HepG2급정상세포L-02적총단백중,통과pull-down기술포획여VP3상호작용적특이성단백질조분.결과 획득료고순도적6His-VP3융합단백;이기작위유이종HepG2세포화L-02세포중포획도적여VP3작용적상관단백질조분존재차이.결론 종류세포HepG2급정상세포L-02중,여VP3작용단백적차이여기재불동세포중적생물학행위상대응.
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