中国生物化学与分子生物学报
中國生物化學與分子生物學報
중국생물화학여분자생물학보
CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY
2007年
2期
130-135
,共6页
姚华宁%韩梅芳%严伟明%习东%罗小平%宁琴
姚華寧%韓梅芳%嚴偉明%習東%囉小平%寧琴
요화저%한매방%엄위명%습동%라소평%저금
纤维介素基因%SARS冠状病毒%核心蛋白%基因表达调控
纖維介素基因%SARS冠狀病毒%覈心蛋白%基因錶達調控
섬유개소기인%SARS관상병독%핵심단백%기인표체조공
SARS冠状病毒核心蛋白对hfgl2纤维介素基因有激活作用,采用实时荧光定量PCR和Western印迹已验证了hfgl2基因在mRNA和蛋白水平的表达.为进一步明确在SARS冠状病毒核心蛋白刺激下,hfgl2纤维介素基因5'端非编码区对转录激活起重要作用的转录调控序列,构建了一系列hfgl2基因启动子荧光素酶报告基因质粒,将其与SARS冠状病毒核心蛋白真核表达质粒共转染CHO细胞.结果表明,转染前3个质粒hfgl2p(-1334)LUC、hfgl2p(-997)LUC、hfgl2p(-816)LUC的细胞的相对荧光素酶活性无显著改变;但转染hfgl2p(-468)LUC质粒的细胞荧光素酶的活性较前明显降低,说明在hfgl2基因启动子-816位至-468位(相对于转录起始点)之间存在着激活该基因的调控序列.本研究在一定程度上从分子水平揭示了SARS冠状病毒蛋白与宿主纤维介素基因之间的关系.
SARS冠狀病毒覈心蛋白對hfgl2纖維介素基因有激活作用,採用實時熒光定量PCR和Western印跡已驗證瞭hfgl2基因在mRNA和蛋白水平的錶達.為進一步明確在SARS冠狀病毒覈心蛋白刺激下,hfgl2纖維介素基因5'耑非編碼區對轉錄激活起重要作用的轉錄調控序列,構建瞭一繫列hfgl2基因啟動子熒光素酶報告基因質粒,將其與SARS冠狀病毒覈心蛋白真覈錶達質粒共轉染CHO細胞.結果錶明,轉染前3箇質粒hfgl2p(-1334)LUC、hfgl2p(-997)LUC、hfgl2p(-816)LUC的細胞的相對熒光素酶活性無顯著改變;但轉染hfgl2p(-468)LUC質粒的細胞熒光素酶的活性較前明顯降低,說明在hfgl2基因啟動子-816位至-468位(相對于轉錄起始點)之間存在著激活該基因的調控序列.本研究在一定程度上從分子水平揭示瞭SARS冠狀病毒蛋白與宿主纖維介素基因之間的關繫.
SARS관상병독핵심단백대hfgl2섬유개소기인유격활작용,채용실시형광정량PCR화Western인적이험증료hfgl2기인재mRNA화단백수평적표체.위진일보명학재SARS관상병독핵심단백자격하,hfgl2섬유개소기인5'단비편마구대전록격활기중요작용적전록조공서렬,구건료일계렬hfgl2기인계동자형광소매보고기인질립,장기여SARS관상병독핵심단백진핵표체질립공전염CHO세포.결과표명,전염전3개질립hfgl2p(-1334)LUC、hfgl2p(-997)LUC、hfgl2p(-816)LUC적세포적상대형광소매활성무현저개변;단전염hfgl2p(-468)LUC질립적세포형광소매적활성교전명현강저,설명재hfgl2기인계동자-816위지-468위(상대우전록기시점)지간존재착격활해기인적조공서렬.본연구재일정정도상종분자수평게시료SARS관상병독단백여숙주섬유개소기인지간적관계.