第四军医大学学报
第四軍醫大學學報
제사군의대학학보
JOURNAL OF THE FOURTH MILITARY MEDICAL UNIVERSITY
2008年
6期
489-491
,共3页
尤玉琴%黄黎珍%刘光泽%佟明华%李秀梅%胡莲美%顾为望%孔祥平
尤玉琴%黃黎珍%劉光澤%佟明華%李秀梅%鬍蓮美%顧為望%孔祥平
우옥금%황려진%류광택%동명화%리수매%호련미%고위망%공상평
肝炎病毒,乙型%小鼠转基因,肝炎表面抗原,乙型%肝炎核心抗原,乙型%血清%DNA
肝炎病毒,乙型%小鼠轉基因,肝炎錶麵抗原,乙型%肝炎覈心抗原,乙型%血清%DNA
간염병독,을형%소서전기인,간염표면항원,을형%간염핵심항원,을형%혈청%DNA
目的: 建立C型HBV转基因小鼠,为乙肝防治研究提供实验动物模型.方法: 采用受精卵显微注射法,制备HBV转基因小鼠,用PCR,ELISA,荧光定量PCR和免疫组化的方法研究HBV基因在转基因小鼠体内的整合、复制和表达情况.结果: 注射受精卵2840枚,筛选注射后成活的受精卵共2256枚,注射成活率79.4%.注射后受精卵共移植假孕雌鼠85只,其中有42只怀孕,假孕雌鼠妊娠率49%,共产下F0代小鼠168只,PCR检测共有14只小鼠阳性,其中ELISA检测血清HBsAg阳性5只,HBeAg均阴性.荧光定量PCR血清HBV DNA显示,2只小鼠的拷贝数分别为3.12×105copies/L,1.98×105copies/L,经传代产下F1代小鼠61只,PCR检测HBV DNA阳性5只,ELISA检测HBsAg阳性4只,其中肝脏HBsAg免疫组化阳性2只,HBcAg均阴性,且肝组织表达HBsAg为胞浆型.结论: 构建的C型HBV基因不但可以在转基因小鼠体内进行复制表达,而且可以遗传给下一代小鼠.
目的: 建立C型HBV轉基因小鼠,為乙肝防治研究提供實驗動物模型.方法: 採用受精卵顯微註射法,製備HBV轉基因小鼠,用PCR,ELISA,熒光定量PCR和免疫組化的方法研究HBV基因在轉基因小鼠體內的整閤、複製和錶達情況.結果: 註射受精卵2840枚,篩選註射後成活的受精卵共2256枚,註射成活率79.4%.註射後受精卵共移植假孕雌鼠85隻,其中有42隻懷孕,假孕雌鼠妊娠率49%,共產下F0代小鼠168隻,PCR檢測共有14隻小鼠暘性,其中ELISA檢測血清HBsAg暘性5隻,HBeAg均陰性.熒光定量PCR血清HBV DNA顯示,2隻小鼠的拷貝數分彆為3.12×105copies/L,1.98×105copies/L,經傳代產下F1代小鼠61隻,PCR檢測HBV DNA暘性5隻,ELISA檢測HBsAg暘性4隻,其中肝髒HBsAg免疫組化暘性2隻,HBcAg均陰性,且肝組織錶達HBsAg為胞漿型.結論: 構建的C型HBV基因不但可以在轉基因小鼠體內進行複製錶達,而且可以遺傳給下一代小鼠.
목적: 건립C형HBV전기인소서,위을간방치연구제공실험동물모형.방법: 채용수정란현미주사법,제비HBV전기인소서,용PCR,ELISA,형광정량PCR화면역조화적방법연구HBV기인재전기인소서체내적정합、복제화표체정황.결과: 주사수정란2840매,사선주사후성활적수정란공2256매,주사성활솔79.4%.주사후수정란공이식가잉자서85지,기중유42지부잉,가잉자서임신솔49%,공산하F0대소서168지,PCR검측공유14지소서양성,기중ELISA검측혈청HBsAg양성5지,HBeAg균음성.형광정량PCR혈청HBV DNA현시,2지소서적고패수분별위3.12×105copies/L,1.98×105copies/L,경전대산하F1대소서61지,PCR검측HBV DNA양성5지,ELISA검측HBsAg양성4지,기중간장HBsAg면역조화양성2지,HBcAg균음성,차간조직표체HBsAg위포장형.결론: 구건적C형HBV기인불단가이재전기인소서체내진행복제표체,이차가이유전급하일대소서.
