CAJ | 학술논문

近年来,苹果遗传转化研究取得了较大的进展,已有多种标记基因和目的基因成功转入苹果中并且得到稳定表达和遗传.农杆菌介导法是苹果上应用的主要转化方法,叶片再生不定芽途径是被广泛应用的受体系统.影响农杆菌介导成功与否的因素很多,文章从以下几方面综述了目前的有关研究成果:①转化方法.因农杆菌介导法简便、高效,应用最广泛.但在转化结束后除菌不彻底易造成假阳性植株,应用直接转化法可以减少假阳性植株,提高转化率.发展苹果直接转化法,一方面需要深入研究原生质体培养,另一方面可以选用不需要原生质体制备和再生的方法,如基因枪法.②叶片再生能力.影响叶片高效再生因素包括试材的基因型,基本培养基类型,培养基中植物生长调节物质的种类及配比,光照条件和接种前叶片的生理生化状态(包括苗龄、叶片成熟度、叶片不同部位以及外植体的来源等),其中试材基因型是最重要的因子.③菌株类型.应根据不同的受体基因型选择不同的菌株类型.④农杆菌侵染条件.繁殖速度快的菌株侵菌时间宜短,繁殖速度较慢的菌株可适当延长侵菌时间.对农杆菌敏感的植株,可采用较低的OD值和较短的浸泡时间.一般菌液浓度范围是OD600＝0.05～0.70,侵染时间不超过30 min;共培养时间必须长于16 h,但要以不对叶片造成伤害又最大限度提高转化效率为标准;植物酚类化合物乙酰丁香酮(AS)、渗透保护剂磷酸甜菜碱(BP)能提高农杆菌的毒力,从而提高其侵染能力.最后,指出目前依然存在转化效率不高、外源基因表达强度不够、对转化植株的选择不够重视等诸多问题.
근년래,평과유전전화연구취득료교대적진전,이유다충표기기인화목적기인성공전입평과중병차득도은정표체화유전.농간균개도법시평과상응용적주요전화방법,협편재생불정아도경시피엄범응용적수체계통.영향농간균개도성공여부적인소흔다,문장종이하궤방면종술료목전적유관연구성과:①전화방법.인농간균개도법간편、고효,응용최엄범.단재전화결속후제균불철저역조성가양성식주,응용직접전화법가이감소가양성식주,제고전화솔.발전평과직접전화법,일방면수요심입연구원생질체배양,령일방면가이선용불수요원생질체제비화재생적방법,여기인창법.②협편재생능력.영향협편고효재생인소포괄시재적기인형,기본배양기류형,배양기중식물생장조절물질적충류급배비,광조조건화접충전협편적생리생화상태(포괄묘령、협편성숙도、협편불동부위이급외식체적래원등),기중시재기인형시최중요적인자.③균주류형.응근거불동적수체기인형선택불동적균주류형.④농간균침염조건.번식속도쾌적균주침균시간의단,번식속도교만적균주가괄당연장침균시간.대농간균민감적식주,가채용교저적OD치화교단적침포시간.일반균액농도범위시OD600＝0.05～0.70,침염시간불초과30 min;공배양시간필수장우16 h,단요이불대협편조성상해우최대한도제고전화효솔위표준;식물분류화합물을선정향동(AS)、삼투보호제린산첨채감(BP)능제고농간균적독력,종이제고기침염능력.최후,지출목전의연존재전화효솔불고、외원기인표체강도불구、대전화식주적선택불구중시등제다문제.
Main progress of transgenic techniques in apple made in recent years was summarized, and related research achievements in various aspects like transformation method, regenerating ability of explants, strain type and infection conditions of Agrobacterium were reviewed. On this basis, the current bottlenecks in transgenic techniques in apple were put forward.