猪PBD-1稳定转染细胞系的建立
저PBD-1은정전염세포계적건립
  • 万方数据
    湖北畜牧兽医 호북축목수의
    HUBEI JOURNAL OF ANIMAL AND VETERINARY SCIENCES
    2010年 4期 8-10 ,共3页

    杨永森%高其双%黄海军%吕景福%陶弼菲%向敏%陈志华%陈橙

    양영삼%고기쌍%황해군%려경복%도필비%향민%진지화%진등

    猪β防御素1%真核表达载体%marc-145%细胞%稳定转染 豬β防禦素1%真覈錶達載體%marc-145%細胞%穩定轉染
    저β방어소1%진핵표체재체%marc-145%세포%은정전염
    目的:构建稳定表达猪PBD-1的转基因细胞系,为稳定生产猪PBD-1并将其应用于新型兽药的开发提供生产细胞源.方法:真核表达载体pIRES2-EGFP-PBD-1经酶切和测序鉴定后.用脂质体介导法转染marc-145细胞,通过不同浓度的G418加压筛选,和进一步采用单个克隆法筛选,建立稳定转染的marc-145细胞系,用RT-PCR及抑菌试验检测PBD-1的表达.结果:建立了稳定转染的marc-145细胞系,成功地表达目的基因,其培养上清液及细胞冻融液具有抑菌作用.结论:利用真核表达载体pIRES2-EGFP-PBD-1稳定转染marc-145细胞系,为进一步研究猪PBD-1的生物学特性及其在兽用生物制品上的应用奠定了基础.
    목적:구건은정표체저PBD-1적전기인세포계,위은정생산저PBD-1병장기응용우신형수약적개발제공생산세포원.방법:진핵표체재체pIRES2-EGFP-PBD-1경매절화측서감정후.용지질체개도법전염marc-145세포,통과불동농도적G418가압사선,화진일보채용단개극륭법사선,건립은정전염적marc-145세포계,용RT-PCR급억균시험검측PBD-1적표체.결과:건립료은정전염적marc-145세포계,성공지표체목적기인,기배양상청액급세포동융액구유억균작용.결론:이용진핵표체재체pIRES2-EGFP-PBD-1은정전염marc-145세포계,위진일보연구저PBD-1적생물학특성급기재수용생물제품상적응용전정료기출.
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