滨州医学院学报
濱州醫學院學報
빈주의학원학보
JOURNAL OF BINZHOU MEDICAL COLLEGE
2010年
5期
337-341
,共5页
齐湘杰%畅继武%董美钰%马富玲%孙光%马腾骧
齊湘傑%暢繼武%董美鈺%馬富玲%孫光%馬騰驤
제상걸%창계무%동미옥%마부령%손광%마등양
膀胱移行细胞癌%基因%BQ135232%抑制消减杂交
膀胱移行細胞癌%基因%BQ135232%抑製消減雜交
방광이행세포암%기인%BQ135232%억제소감잡교
目的 克隆并鉴定膀胱移行上皮细胞癌(BTCC)的差异表达基因.方法 应用抑制消减杂交技术(SSH)构建膀胱癌和其正常上皮组织差异表达的cDNA消减文库,进一步利用斑点印迹杂交筛选出BTCC差异表达的基因, 对其中明显差异表达的BQ135232应用SMART RACE克隆全长,再应用免疫荧光原位杂交进行染色体定位,并应用Northern blot进行差异表达分析.结果 成功构建了人膀胱癌组织的cDNA消减文库,共含有376个阳性克隆和83个阴性克隆.随机挑出的100个阳性克隆中,76个克隆含有肿瘤差异表达的基因片段,对其进行同源性比对分析,其中有66个克隆为已知基因,其余的10个克隆代表5种未知基因.未知基因中BQ135232共有3个拷贝,染色体定位发现其位于第12号染色体近末端处.Northern杂交分析显示它在膀胱癌组织中高表达,而在正常膀胱组织中无明显表达.结论 本研究表明BQ135232是跟膀胱癌发生发展密切相关的新基因,它的成功克隆为阐明膀胱癌发生发展的分子生物学机制开辟了新的途径.
目的 剋隆併鑒定膀胱移行上皮細胞癌(BTCC)的差異錶達基因.方法 應用抑製消減雜交技術(SSH)構建膀胱癌和其正常上皮組織差異錶達的cDNA消減文庫,進一步利用斑點印跡雜交篩選齣BTCC差異錶達的基因, 對其中明顯差異錶達的BQ135232應用SMART RACE剋隆全長,再應用免疫熒光原位雜交進行染色體定位,併應用Northern blot進行差異錶達分析.結果 成功構建瞭人膀胱癌組織的cDNA消減文庫,共含有376箇暘性剋隆和83箇陰性剋隆.隨機挑齣的100箇暘性剋隆中,76箇剋隆含有腫瘤差異錶達的基因片段,對其進行同源性比對分析,其中有66箇剋隆為已知基因,其餘的10箇剋隆代錶5種未知基因.未知基因中BQ135232共有3箇拷貝,染色體定位髮現其位于第12號染色體近末耑處.Northern雜交分析顯示它在膀胱癌組織中高錶達,而在正常膀胱組織中無明顯錶達.結論 本研究錶明BQ135232是跟膀胱癌髮生髮展密切相關的新基因,它的成功剋隆為闡明膀胱癌髮生髮展的分子生物學機製開闢瞭新的途徑.
목적 극륭병감정방광이행상피세포암(BTCC)적차이표체기인.방법 응용억제소감잡교기술(SSH)구건방광암화기정상상피조직차이표체적cDNA소감문고,진일보이용반점인적잡교사선출BTCC차이표체적기인, 대기중명현차이표체적BQ135232응용SMART RACE극륭전장,재응용면역형광원위잡교진행염색체정위,병응용Northern blot진행차이표체분석.결과 성공구건료인방광암조직적cDNA소감문고,공함유376개양성극륭화83개음성극륭.수궤도출적100개양성극륭중,76개극륭함유종류차이표체적기인편단,대기진행동원성비대분석,기중유66개극륭위이지기인,기여적10개극륭대표5충미지기인.미지기인중BQ135232공유3개고패,염색체정위발현기위우제12호염색체근말단처.Northern잡교분석현시타재방광암조직중고표체,이재정상방광조직중무명현표체.결론 본연구표명BQ135232시근방광암발생발전밀절상관적신기인,타적성공극륭위천명방광암발생발전적분자생물학궤제개벽료신적도경.
