中国农学通报
中國農學通報
중국농학통보
CHINESE AGRICULTURAL SCIENCE BULLETIN
2012年
4期
104-109
,共6页
朱琴%康宗利%简元才%丁云花%康俊根
硃琴%康宗利%簡元纔%丁雲花%康俊根
주금%강종리%간원재%정운화%강준근
甘蓝%雄性不育%orf138%Tail-PCR技术
甘藍%雄性不育%orf138%Tail-PCR技術
감람%웅성불육%orf138%Tail-PCR기술
以甘蓝Ogura细胞质雄性不育系为材料,找出能够有效鉴定由orf138导致的甘蓝CMS的标记,并明确此基因在甘蓝Ogu CMS基因组中的位置.根据萝卜CMS相关基因orf138的序列信息,设计特异引物,并在甘蓝不同类型不育系和保持系中鉴定PCR产物的稳定性.随后利用Tail-PCR技术,扩增获得此基因的侧翼序列并进行了生物信息学分析.根据orf138的全长序列设计引物B0138300BF/R,在甘蓝不育型材料中,能够稳定扩增出300 bp左右的单一条带,而在其他细胞质不育类型和可育材料中均未扩出条带,经多次验证结果稳定可靠.甘蓝中orf138的上下游侧翼序列有效碱基1789 bp,通过生物信息学分析,获得包括起始密码和终止密码的orf138的完整序列共417 bp.同源性比对结果显示:与甘蓝型油菜、白菜和萝卜的or38片段具有高度保守性.分析侧翼序列表明甘蓝orf138的3’端是由ORF83、trnfM、ORF125等基因片段构成的一个复杂序列.获得了甘蓝OguCMS特异的分子鉴定标记,明确了orf138在甘蓝线粒体中的位置,以上结果为甘蓝雄性不育的进一步研究奠定良好的基础.
以甘藍Ogura細胞質雄性不育繫為材料,找齣能夠有效鑒定由orf138導緻的甘藍CMS的標記,併明確此基因在甘藍Ogu CMS基因組中的位置.根據蘿蔔CMS相關基因orf138的序列信息,設計特異引物,併在甘藍不同類型不育繫和保持繫中鑒定PCR產物的穩定性.隨後利用Tail-PCR技術,擴增穫得此基因的側翼序列併進行瞭生物信息學分析.根據orf138的全長序列設計引物B0138300BF/R,在甘藍不育型材料中,能夠穩定擴增齣300 bp左右的單一條帶,而在其他細胞質不育類型和可育材料中均未擴齣條帶,經多次驗證結果穩定可靠.甘藍中orf138的上下遊側翼序列有效堿基1789 bp,通過生物信息學分析,穫得包括起始密碼和終止密碼的orf138的完整序列共417 bp.同源性比對結果顯示:與甘藍型油菜、白菜和蘿蔔的or38片段具有高度保守性.分析側翼序列錶明甘藍orf138的3’耑是由ORF83、trnfM、ORF125等基因片段構成的一箇複雜序列.穫得瞭甘藍OguCMS特異的分子鑒定標記,明確瞭orf138在甘藍線粒體中的位置,以上結果為甘藍雄性不育的進一步研究奠定良好的基礎.
이감람Ogura세포질웅성불육계위재료,조출능구유효감정유orf138도치적감람CMS적표기,병명학차기인재감람Ogu CMS기인조중적위치.근거라복CMS상관기인orf138적서렬신식,설계특이인물,병재감람불동류형불육계화보지계중감정PCR산물적은정성.수후이용Tail-PCR기술,확증획득차기인적측익서렬병진행료생물신식학분석.근거orf138적전장서렬설계인물B0138300BF/R,재감람불육형재료중,능구은정확증출300 bp좌우적단일조대,이재기타세포질불육류형화가육재료중균미확출조대,경다차험증결과은정가고.감람중orf138적상하유측익서렬유효감기1789 bp,통과생물신식학분석,획득포괄기시밀마화종지밀마적orf138적완정서렬공417 bp.동원성비대결과현시:여감람형유채、백채화라복적or38편단구유고도보수성.분석측익서렬표명감람orf138적3’단시유ORF83、trnfM、ORF125등기인편단구성적일개복잡서렬.획득료감람OguCMS특이적분자감정표기,명학료orf138재감람선립체중적위치,이상결과위감람웅성불육적진일보연구전정량호적기출.
