中国兽医学报
中國獸醫學報
중국수의학보
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY SCIENCE
2001年
3期
266-269
,共4页
雷连成%韩文瑜%王世若%冯现伟%江文正%陈伟
雷連成%韓文瑜%王世若%馮現偉%江文正%陳偉
뢰련성%한문유%왕세약%풍현위%강문정%진위
大肠杆菌%耐药基因%氧氟沙星
大腸桿菌%耐藥基因%氧氟沙星
대장간균%내약기인%양불사성
取临床分离的13株氧氟沙星(OFL)耐药菌,提取其质粒DNA,经纯化后作为模板,用PCR扩增gyrA基因喹诺酮耐药决定区(QRDR); PCR阳性质粒的菌株,再扩增其染色体gyrA基因QRDR,直接测定质粒和染色体DNA扩增产物序列并进行分析。只有CE01菌株的质粒DNA和染色体DNA可扩增出长度为668 bp的PCR产物片段,两者基因序列相同率为98.17%,相同位点突变相同的碱基有5个,相同位点突变不同的碱基有2个。与基因数据库中的大肠杆菌gyrA 基因相应序列比较,该菌质粒DNA PCR产物同源率为97.80%,有13个位点发生突变,3个氨基酸被替换;染色体DNA PCR产物同源率98.00%,有12个位点发生突变,2个氨基酸被替换;都包括了国外资料报道的突变率较高的第83位氨基酸的突变。结果表明,该菌株质粒和染色体上都存在喹诺酮耐药基因,对OFL的耐药可能是质粒诱导和染色体突变共同作用的结果。
取臨床分離的13株氧氟沙星(OFL)耐藥菌,提取其質粒DNA,經純化後作為模闆,用PCR擴增gyrA基因喹諾酮耐藥決定區(QRDR); PCR暘性質粒的菌株,再擴增其染色體gyrA基因QRDR,直接測定質粒和染色體DNA擴增產物序列併進行分析。隻有CE01菌株的質粒DNA和染色體DNA可擴增齣長度為668 bp的PCR產物片段,兩者基因序列相同率為98.17%,相同位點突變相同的堿基有5箇,相同位點突變不同的堿基有2箇。與基因數據庫中的大腸桿菌gyrA 基因相應序列比較,該菌質粒DNA PCR產物同源率為97.80%,有13箇位點髮生突變,3箇氨基痠被替換;染色體DNA PCR產物同源率98.00%,有12箇位點髮生突變,2箇氨基痠被替換;都包括瞭國外資料報道的突變率較高的第83位氨基痠的突變。結果錶明,該菌株質粒和染色體上都存在喹諾酮耐藥基因,對OFL的耐藥可能是質粒誘導和染色體突變共同作用的結果。
취림상분리적13주양불사성(OFL)내약균,제취기질립DNA,경순화후작위모판,용PCR확증gyrA기인규낙동내약결정구(QRDR); PCR양성질립적균주,재확증기염색체gyrA기인QRDR,직접측정질립화염색체DNA확증산물서렬병진행분석。지유CE01균주적질립DNA화염색체DNA가확증출장도위668 bp적PCR산물편단,량자기인서렬상동솔위98.17%,상동위점돌변상동적감기유5개,상동위점돌변불동적감기유2개。여기인수거고중적대장간균gyrA 기인상응서렬비교,해균질립DNA PCR산물동원솔위97.80%,유13개위점발생돌변,3개안기산피체환;염색체DNA PCR산물동원솔98.00%,유12개위점발생돌변,2개안기산피체환;도포괄료국외자료보도적돌변솔교고적제83위안기산적돌변。결과표명,해균주질립화염색체상도존재규낙동내약기인,대OFL적내약가능시질립유도화염색체돌변공동작용적결과。