吉林大学学报（医学版）
吉林大學學報（醫學版）
길림대학학보（의학판）
JOURNAL OF JILIN UNIVERSITY(MEDICINE EDITION)
2007年
2期
297-300
,共4页
李玉香%王峰%牛俊奇%闫红青%张锦前%姜艳芳
李玉香%王峰%牛俊奇%閆紅青%張錦前%薑豔芳
리옥향%왕봉%우준기%염홍청%장금전%강염방
肝细胞生长因子%遗传载体%基因表达%COS细胞
肝細胞生長因子%遺傳載體%基因錶達%COS細胞
간세포생장인자%유전재체%기인표체%COS세포
目的:构建人肝细胞生长因子(HGF)的真核表达载体,并在COS7细胞中进行表达.方法:利用PCR技术扩增HGF基因,与PCI-Neo载体连接,构建成重组真核表达载体PCI-neo-HGF,应用限制性内切酶法及测序方法进行鉴定.利用脂质体将PCI-HGF转入COS7细胞系中,用ELISA法检测培养液上清中的HGF的表达水平.结果:重组真核表达载体PCI-neo-HGF经限制性内切酶分析,片段与理论值相符,测序结果与GenBank对比,HGFcDNA序列同源性99%,插入正确;将重组真核表达载体PCI-neo-HGF转染COS7细胞,于转染12 h开始有表达,36～72 h表达量较高(约2 000 ng·L-1),以后逐渐下降.结论:成功构建了带有HGF基因真核表达载体,并能在转染细胞中表达.
目的:構建人肝細胞生長因子(HGF)的真覈錶達載體,併在COS7細胞中進行錶達.方法:利用PCR技術擴增HGF基因,與PCI-Neo載體連接,構建成重組真覈錶達載體PCI-neo-HGF,應用限製性內切酶法及測序方法進行鑒定.利用脂質體將PCI-HGF轉入COS7細胞繫中,用ELISA法檢測培養液上清中的HGF的錶達水平.結果:重組真覈錶達載體PCI-neo-HGF經限製性內切酶分析,片段與理論值相符,測序結果與GenBank對比,HGFcDNA序列同源性99%,插入正確;將重組真覈錶達載體PCI-neo-HGF轉染COS7細胞,于轉染12 h開始有錶達,36～72 h錶達量較高(約2 000 ng·L-1),以後逐漸下降.結論:成功構建瞭帶有HGF基因真覈錶達載體,併能在轉染細胞中錶達.
목적:구건인간세포생장인자(HGF)적진핵표체재체,병재COS7세포중진행표체.방법:이용PCR기술확증HGF기인,여PCI-Neo재체련접,구건성중조진핵표체재체PCI-neo-HGF,응용한제성내절매법급측서방법진행감정.이용지질체장PCI-HGF전입COS7세포계중,용ELISA법검측배양액상청중적HGF적표체수평.결과:중조진핵표체재체PCI-neo-HGF경한제성내절매분석,편단여이론치상부,측서결과여GenBank대비,HGFcDNA서렬동원성99%,삽입정학;장중조진핵표체재체PCI-neo-HGF전염COS7세포,우전염12 h개시유표체,36～72 h표체량교고(약2 000 ng·L-1),이후축점하강.결론:성공구건료대유HGF기인진핵표체재체,병능재전염세포중표체.
