CAJ | 학술논문

口蹄疫病毒非结构蛋白VPg1-2、VPg2-3、VPg3基因的克隆、表达及VPg1-2抗体持续时间的研究
구제역병독비결구단백VPg1-2、VPg2-3、VPg3기인적극륭、표체급VPg1-2항체지속시간적연구
Research on Cloning and Expression of VPg1-2, VPg2-3, VPg3 Gene Fragments of Foot-and-Mouth Disease Virus and the Antibody Dynamics of Expressed VPg1-2 Protein

万方数据

中国农业科学中國農業科學 중국농업과학
SCIENTIA AGRICULTURA SINICA
2007年 3期 601-607 ,共7页

孙明%王宏伟%田克恭%王传彬%陈西钊%遇秀玲%金萍%曹振%许燕辉%赵心力

손명%왕굉위%전극공%왕전빈%진서쇠%우수령%금평%조진%허연휘%조심력

口蹄疫病毒%非结构蛋白%抗体消长口蹄疫病毒%非結構蛋白%抗體消長
구제역병독%비결구단백%항체소장

[目的]表达口蹄疫病毒(Foot-and-Mouth Disease Virus,FMDV)非结构蛋白VPg1-2、VPg2-3、VPg3,用于FMDV感染与灭活疫苗动物鉴别诊断和其蛋白功能研究.[方法]对O 型口蹄疫病毒太保毒株3ABC 基因片段中的 VPg1-2 (3B1-2)、VPg2-3 (3B2-3)、VPg3 (3B3)基因进行扩增和亚克隆,并将它们分别插入pGEX-4T-1 表达载体构建了重组表达质粒,经IPTG诱导后,进行Western blotting 分析.以纯化的VPg1-2表达蛋白为抗原建立间接ELISA,对背景清楚的实验牛血清进行检测.[结果]表达的VPg1-2、VPg2-3蛋白可与FMDV阳性血清发生特异性反应,表达的VPg3蛋白没有反应.VPg1-2表达蛋白与对照组(C组)和灭活疫苗反复免疫组(CI组)牛血清均不发生反应,与未免疫直接攻毒组(D组)血清均发生反应,与部分免疫后攻毒组(I组)(4/7)血清发生反应,与部分I组(3/7)血清不发生反应;D组和I组VPg1-2表达蛋白抗体持续时间最长可达90 d以上,最早检出相应抗体的时间为攻毒后第10天.[结论]表达的VPg1-2抗原用于健康牛群、免疫后未感染牛群以及未免疫感染牛群的鉴别诊断的特异性、敏感性达到100%,对免疫后感染牛群进行检测时可能有一定的漏检现象.
[목적]표체구제역병독(Foot-and-Mouth Disease Virus,FMDV)비결구단백VPg1-2、VPg2-3、VPg3,용우FMDV감염여멸활역묘동물감별진단화기단백공능연구.[방법]대O 형구제역병독태보독주3ABC 기인편단중적 VPg1-2 (3B1-2)、VPg2-3 (3B2-3)、VPg3 (3B3)기인진행확증화아극륭,병장타문분별삽입pGEX-4T-1 표체재체구건료중조표체질립,경IPTG유도후,진행Western blotting 분석.이순화적VPg1-2표체단백위항원건립간접ELISA,대배경청초적실험우혈청진행검측.[결과]표체적VPg1-2、VPg2-3단백가여FMDV양성혈청발생특이성반응,표체적VPg3단백몰유반응.VPg1-2표체단백여대조조(C조)화멸활역묘반복면역조(CI조)우혈청균불발생반응,여미면역직접공독조(D조)혈청균발생반응,여부분면역후공독조(I조)(4/7)혈청발생반응,여부분I조(3/7)혈청불발생반응;D조화I조VPg1-2표체단백항체지속시간최장가체90 d이상,최조검출상응항체적시간위공독후제10천.[결론]표체적VPg1-2항원용우건강우군、면역후미감염우군이급미면역감염우군적감별진단적특이성、민감성체도100%,대면역후감염우군진행검측시가능유일정적루검현상.