农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2008年
5期
842-846
,共5页
柴燕文%马晖玲%谢小冬%毛娟%田晓玲%任振新
柴燕文%馬暉玲%謝小鼕%毛娟%田曉玲%任振新
시연문%마휘령%사소동%모연%전효령%임진신
植物表达载体%绿色荧光蛋白基因%和田苜蓿%基因转化
植物錶達載體%綠色熒光蛋白基因%和田苜蓿%基因轉化
식물표체재체%록색형광단백기인%화전목숙%기인전화
将绿色荧光蛋白(GFP)基因片段插入到pBIl21-Lyz多克隆区,构建了重组表达载体pBI121-Lyz-GFPo经Sma Ⅰ与BamH Ⅰ双酶切和PCR验证重组质粒,均能得到约750 bp的目的片段,通过进一步测序证明,GFP基因已成功地连接到pBI121-Lyz中,且重组质粒连接方向正确.利用冻融法将重组质粒导人根癌农杆菌(Agrobactcrium tumenfaciens)LBA4404,用叶盘法转化和田苜蓿(Medicago sativa L.cv.Xinjiang Daye),筛选出具有卡那霉素抗性的愈伤组织,经PCR扩增和荧光显微镜检测证明,重组基因已成功地转化到和田苜蓿愈伤组织中.
將綠色熒光蛋白(GFP)基因片段插入到pBIl21-Lyz多剋隆區,構建瞭重組錶達載體pBI121-Lyz-GFPo經Sma Ⅰ與BamH Ⅰ雙酶切和PCR驗證重組質粒,均能得到約750 bp的目的片段,通過進一步測序證明,GFP基因已成功地連接到pBI121-Lyz中,且重組質粒連接方嚮正確.利用凍融法將重組質粒導人根癌農桿菌(Agrobactcrium tumenfaciens)LBA4404,用葉盤法轉化和田苜蓿(Medicago sativa L.cv.Xinjiang Daye),篩選齣具有卡那黴素抗性的愈傷組織,經PCR擴增和熒光顯微鏡檢測證明,重組基因已成功地轉化到和田苜蓿愈傷組織中.
장록색형광단백(GFP)기인편단삽입도pBIl21-Lyz다극륭구,구건료중조표체재체pBI121-Lyz-GFPo경Sma Ⅰ여BamH Ⅰ쌍매절화PCR험증중조질립,균능득도약750 bp적목적편단,통과진일보측서증명,GFP기인이성공지련접도pBI121-Lyz중,차중조질립련접방향정학.이용동융법장중조질립도인근암농간균(Agrobactcrium tumenfaciens)LBA4404,용협반법전화화전목숙(Medicago sativa L.cv.Xinjiang Daye),사선출구유잡나매소항성적유상조직,경PCR확증화형광현미경검측증명,중조기인이성공지전화도화전목숙유상조직중.