中国老年学杂志
中國老年學雜誌
중국노년학잡지
CHINESE JOURNAL OF GERONTOLOGY
2009年
11期
1352-1353
,共2页
RNA干扰%生存素%结肠癌%shRNA
RNA榦擾%生存素%結腸癌%shRNA
RNA간우%생존소%결장암%shRNA
目的 构建针对人结肠癌细胞系Lovo的高效率沉默Survivin的shRNA表达载体.方法 合成特异性干扰Survivin的小发卡RNA(shRNA)片段,并与pGenesil2 载体连接,构建Survivin干扰载体(pGenesil2-Survivin shRNA).利用脂质体将其转染Lovo细胞,分为正常细胞对照组和3个shRNA干扰组(pGenesil2-Survivin1、2及3),应用荧光显微镜对转染效果进行评价,应用Western印迹和免疫细胞化学法分析转染后Lovo中Survivin的蛋白表达水平.结果 插入片段测序结果与合成shRNA结果一致;转染效率可达70%左右,转染pGenesil2-Survivin shRNA后,3个干扰组的Lovo细胞中Survivin蛋白表达水平均较正常对照组显著降低(P＜0.01).结论 成功构建了能高效沉默Survivin的RNAi表达载体;且pGenesil2-Survivin高效抑制结肠癌Lovo细胞中Survivin基因表达.
目的 構建針對人結腸癌細胞繫Lovo的高效率沉默Survivin的shRNA錶達載體.方法 閤成特異性榦擾Survivin的小髮卡RNA(shRNA)片段,併與pGenesil2 載體連接,構建Survivin榦擾載體(pGenesil2-Survivin shRNA).利用脂質體將其轉染Lovo細胞,分為正常細胞對照組和3箇shRNA榦擾組(pGenesil2-Survivin1、2及3),應用熒光顯微鏡對轉染效果進行評價,應用Western印跡和免疫細胞化學法分析轉染後Lovo中Survivin的蛋白錶達水平.結果 插入片段測序結果與閤成shRNA結果一緻;轉染效率可達70%左右,轉染pGenesil2-Survivin shRNA後,3箇榦擾組的Lovo細胞中Survivin蛋白錶達水平均較正常對照組顯著降低(P＜0.01).結論 成功構建瞭能高效沉默Survivin的RNAi錶達載體;且pGenesil2-Survivin高效抑製結腸癌Lovo細胞中Survivin基因錶達.
목적 구건침대인결장암세포계Lovo적고효솔침묵Survivin적shRNA표체재체.방법 합성특이성간우Survivin적소발잡RNA(shRNA)편단,병여pGenesil2 재체련접,구건Survivin간우재체(pGenesil2-Survivin shRNA).이용지질체장기전염Lovo세포,분위정상세포대조조화3개shRNA간우조(pGenesil2-Survivin1、2급3),응용형광현미경대전염효과진행평개,응용Western인적화면역세포화학법분석전염후Lovo중Survivin적단백표체수평.결과 삽입편단측서결과여합성shRNA결과일치;전염효솔가체70%좌우,전염pGenesil2-Survivin shRNA후,3개간우조적Lovo세포중Survivin단백표체수평균교정상대조조현저강저(P＜0.01).결론 성공구건료능고효침묵Survivin적RNAi표체재체;차pGenesil2-Survivin고효억제결장암Lovo세포중Survivin기인표체.
