西安交通大学学报（医学版）
西安交通大學學報（醫學版）
서안교통대학학보（의학판）
JOURNAL OF XI'AN JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2011年
6期
668-671
,共4页
谭云鹤%种铁%郭子宽%甘为民
譚雲鶴%種鐵%郭子寬%甘為民
담운학%충철%곽자관%감위민
肌源性干细胞%中性蛋白酶%差速贴壁%原代培养%分化%心肌样细胞%鉴定%MyoD%Desmin
肌源性榦細胞%中性蛋白酶%差速貼壁%原代培養%分化%心肌樣細胞%鑒定%MyoD%Desmin
기원성간세포%중성단백매%차속첩벽%원대배양%분화%심기양세포%감정%MyoD%Desmin
目的 探讨小鼠肌源性干细胞(MDSCs)的原代培养方法及其分化潜能,为肌性泌尿组织的细胞修复、治疗奠定基础.方法 运用中性蛋白酶(DispaseⅡ)、胰蛋白酶及Ⅰ型胶原酶联合消化法分离小鼠MDSCs,并运用差速贴壁法进行纯化.倒置显微镜下观察细胞形态,RT-PCR法鉴定MyoD及Desmin的表达,同时对分离的细胞进行成骨、成脂等分化诱导并鉴定.结果 运用中性蛋白酶可很好地消化组织,差速贴壁法能得到纯度较高的MDSCs; RT-PCR检测发现MDSCs不表达MyoD以及Desmin,提示其为不同于肌卫星细胞的肌源性干细胞；成骨诱导检测碱性磷酸酶(ALP)染色(+),成脂诱导油红O染色(+)；其可自体分化诱导为心肌样细胞,免疫荧光法检测心肌肌钙蛋白(cTnI)呈现阳性结果.结论 利用此分离方法可获得纯度较高且具有较强分化潜能的肌源性干细胞,有助于进一步进行组织工程研究.
目的 探討小鼠肌源性榦細胞(MDSCs)的原代培養方法及其分化潛能,為肌性泌尿組織的細胞脩複、治療奠定基礎.方法 運用中性蛋白酶(DispaseⅡ)、胰蛋白酶及Ⅰ型膠原酶聯閤消化法分離小鼠MDSCs,併運用差速貼壁法進行純化.倒置顯微鏡下觀察細胞形態,RT-PCR法鑒定MyoD及Desmin的錶達,同時對分離的細胞進行成骨、成脂等分化誘導併鑒定.結果 運用中性蛋白酶可很好地消化組織,差速貼壁法能得到純度較高的MDSCs; RT-PCR檢測髮現MDSCs不錶達MyoD以及Desmin,提示其為不同于肌衛星細胞的肌源性榦細胞；成骨誘導檢測堿性燐痠酶(ALP)染色(+),成脂誘導油紅O染色(+)；其可自體分化誘導為心肌樣細胞,免疫熒光法檢測心肌肌鈣蛋白(cTnI)呈現暘性結果.結論 利用此分離方法可穫得純度較高且具有較彊分化潛能的肌源性榦細胞,有助于進一步進行組織工程研究.
목적 탐토소서기원성간세포(MDSCs)적원대배양방법급기분화잠능,위기성비뇨조직적세포수복、치료전정기출.방법 운용중성단백매(DispaseⅡ)、이단백매급Ⅰ형효원매연합소화법분리소서MDSCs,병운용차속첩벽법진행순화.도치현미경하관찰세포형태,RT-PCR법감정MyoD급Desmin적표체,동시대분리적세포진행성골、성지등분화유도병감정.결과 운용중성단백매가흔호지소화조직,차속첩벽법능득도순도교고적MDSCs; RT-PCR검측발현MDSCs불표체MyoD이급Desmin,제시기위불동우기위성세포적기원성간세포；성골유도검측감성린산매(ALP)염색(+),성지유도유홍O염색(+)；기가자체분화유도위심기양세포,면역형광법검측심기기개단백(cTnI)정현양성결과.결론 이용차분리방법가획득순도교고차구유교강분화잠능적기원성간세포,유조우진일보진행조직공정연구.
