北京医学
北京醫學
북경의학
BEIJING MEDICAL JOURNAL
2012年
9期
787-791
,共5页
李国利%李庆阁%王倩%张灵霞
李國利%李慶閣%王倩%張靈霞
리국리%리경각%왕천%장령하
结核分枝杆菌%探针熔解分析法%利福平%耐药基因%突变
結覈分枝桿菌%探針鎔解分析法%利福平%耐藥基因%突變
결핵분지간균%탐침용해분석법%리복평%내약기인%돌변
目的 评价PCR-探针熔解分析法(probe melting analysis assay,PMAA)检测结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)对利福平(rifampin,RFP)耐药性的临床应用价值.方法 采用常规比例法和PCR-PMAA对512株MTB临床分离株进行RFP药敏试验,并进行RFP耐药相关基因rpoB DNA测序.结果 以常规比例法为标准,PCR-PMAA检测RFP耐药性的敏感性、特异性分别为97.5％、96.2％,阳性和阴性预测值分别为94.1％、98.4％、符合率及约登指数分别为96.7％及0.93.193株比例法和PCR-PMAA两法检测均耐药的菌株,经DNA测序证实174株rpoB基因RFP耐药决定区(RFP resistance determining region,RRDR)发生单位点密码子突变,19株RRDR发生不同组合型的双位点密码子联合突变；5株比例法检出耐药、PCR-PMAA敏感的菌株,DNA测序rpoB基因未见突变;12株比例法检出敏感、PCR-PMAA耐药的菌株,DNA测序证实其中7株511位点密码子突变,5株533位点密码子突变；302株两法检测均敏感菌株DNA测序结果未见rpoB耐药相关的基因位点突变.PCR-PMAA检测MTB临床分离株rpoB基因突变结果与DNA测序结果完全一致.结论 PCR-PMAA法能高效检出MTB对RFP耐药的相关基因突变,用于检测MTB对RFP耐药性的敏感性高、特异性强,方法简便、快速、价廉,具有良好的临床应用前景.
目的 評價PCR-探針鎔解分析法(probe melting analysis assay,PMAA)檢測結覈分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)對利福平(rifampin,RFP)耐藥性的臨床應用價值.方法 採用常規比例法和PCR-PMAA對512株MTB臨床分離株進行RFP藥敏試驗,併進行RFP耐藥相關基因rpoB DNA測序.結果 以常規比例法為標準,PCR-PMAA檢測RFP耐藥性的敏感性、特異性分彆為97.5％、96.2％,暘性和陰性預測值分彆為94.1％、98.4％、符閤率及約登指數分彆為96.7％及0.93.193株比例法和PCR-PMAA兩法檢測均耐藥的菌株,經DNA測序證實174株rpoB基因RFP耐藥決定區(RFP resistance determining region,RRDR)髮生單位點密碼子突變,19株RRDR髮生不同組閤型的雙位點密碼子聯閤突變；5株比例法檢齣耐藥、PCR-PMAA敏感的菌株,DNA測序rpoB基因未見突變;12株比例法檢齣敏感、PCR-PMAA耐藥的菌株,DNA測序證實其中7株511位點密碼子突變,5株533位點密碼子突變；302株兩法檢測均敏感菌株DNA測序結果未見rpoB耐藥相關的基因位點突變.PCR-PMAA檢測MTB臨床分離株rpoB基因突變結果與DNA測序結果完全一緻.結論 PCR-PMAA法能高效檢齣MTB對RFP耐藥的相關基因突變,用于檢測MTB對RFP耐藥性的敏感性高、特異性彊,方法簡便、快速、價廉,具有良好的臨床應用前景.
목적 평개PCR-탐침용해분석법(probe melting analysis assay,PMAA)검측결핵분지간균(Mycobacterium tuberculosis,MTB)대리복평(rifampin,RFP)내약성적림상응용개치.방법 채용상규비례법화PCR-PMAA대512주MTB림상분리주진행RFP약민시험,병진행RFP내약상관기인rpoB DNA측서.결과 이상규비례법위표준,PCR-PMAA검측RFP내약성적민감성、특이성분별위97.5％、96.2％,양성화음성예측치분별위94.1％、98.4％、부합솔급약등지수분별위96.7％급0.93.193주비례법화PCR-PMAA량법검측균내약적균주,경DNA측서증실174주rpoB기인RFP내약결정구(RFP resistance determining region,RRDR)발생단위점밀마자돌변,19주RRDR발생불동조합형적쌍위점밀마자연합돌변；5주비례법검출내약、PCR-PMAA민감적균주,DNA측서rpoB기인미견돌변;12주비례법검출민감、PCR-PMAA내약적균주,DNA측서증실기중7주511위점밀마자돌변,5주533위점밀마자돌변；302주량법검측균민감균주DNA측서결과미견rpoB내약상관적기인위점돌변.PCR-PMAA검측MTB림상분리주rpoB기인돌변결과여DNA측서결과완전일치.결론 PCR-PMAA법능고효검출MTB대RFP내약적상관기인돌변,용우검측MTB대RFP내약성적민감성고、특이성강,방법간편、쾌속、개렴,구유량호적림상응용전경.
