CAJ | 학술논문

目的:探讨不同冻存液对人诱导性多能干细胞(iPSC)冻存复苏后的存活率及诱导分化的影响,筛选出简单有效的冻存与复苏方法.方法:人iPSC培养至第3代后分组冻存:①含有不同配比胎牛血清(FBS)的细胞冻存液分组:A组[80％培养基(DMEM/F 12)+10％FBS+10％二甲亚砜(DMSO)];B组(70％DMEM/F12+20％ FBS+10％ DMSO);C组(40％DMEM/F 12+50％FBS+ 10％DMSO);D组(90％FBS+10％DMSO).②含有不同配比DMSO的细胞冻存液分组:E组(45％DMEM/F12+50％FBS+5％DMSO);F组(40％DMEM/F 12+50％FBS+10％DMSO);G组(35％DMEM/F12+50％FBS+1 5％DMSO);H组(30％DMEM/F 12+50％FBS+20％ DMSO).以相同方法冻存并复苏人iPSC,观察比较不同组细胞在复苏14d后重新形成典型干细胞集落的数量,并在相同诱导分化体系下,记录复苏人iPSC向神经元和胶质细胞分化的效率.结果:C和F组细胞复苏后形成典型干细胞集落的数量多于其他组(P＜0.05),A和B组细胞复苏后分化为神经元的效率略高于其他实验组.结论:以40％DMEM/F12+50％FBS+10％DMSO配比组合成的细胞冻存液作为人iPSC的冻存保护剂,可使人iPSC的冻存复苏效率最优并保持较好的生物学特性.
목적:탐토불동동존액대인유도성다능간세포(iPSC)동존복소후적존활솔급유도분화적영향,사선출간단유효적동존여복소방법.방법:인iPSC배양지제3대후분조동존:①함유불동배비태우혈청(FBS)적세포동존액분조:A조[80％배양기(DMEM/F 12)+10％FBS+10％이갑아풍(DMSO)];B조(70％DMEM/F12+20％ FBS+10％ DMSO);C조(40％DMEM/F 12+50％FBS+ 10％DMSO);D조(90％FBS+10％DMSO).②함유불동배비DMSO적세포동존액분조:E조(45％DMEM/F12+50％FBS+5％DMSO);F조(40％DMEM/F 12+50％FBS+10％DMSO);G조(35％DMEM/F12+50％FBS+1 5％DMSO);H조(30％DMEM/F 12+50％FBS+20％ DMSO).이상동방법동존병복소인iPSC,관찰비교불동조세포재복소14d후중신형성전형간세포집락적수량,병재상동유도분화체계하,기록복소인iPSC향신경원화효질세포분화적효솔.결과:C화F조세포복소후형성전형간세포집락적수량다우기타조(P＜0.05),A화B조세포복소후분화위신경원적효솔략고우기타실험조.결론:이40％DMEM/F12+50％FBS+10％DMSO배비조합성적세포동존액작위인iPSC적동존보호제,가사인iPSC적동존복소효솔최우병보지교호적생물학특성.