现代免疫学
現代免疫學
현대면역학
CURRENT IMMUNOLOGY
2006年
5期
391-397
,共7页
范怡敏%杨彬%邵红霞%庄义军%程训佳
範怡敏%楊彬%邵紅霞%莊義軍%程訓佳
범이민%양빈%소홍하%장의군%정훈가
户尘螨%克隆化培养%Derp2%序列多样性
戶塵螨%剋隆化培養%Derp2%序列多樣性
호진만%극륭화배양%Derp2%서렬다양성
克隆化培养上海地区户尘螨,获得不同编码序列的重组Der p 2变应原进行当地人群血清特异性IgG分析,探讨其应用价值.从过敏性疾病患者床褥采集分离户尘螨,采用封闭式培养系统进行培养,分离培养单个孕螨获得克隆化的螨群.用RT-PCR的方法扩增不同螨克隆的Der p 2编码基因,插入原核表达载体pET-19b在大肠杆菌内进行表达,所获得的蛋白经Dot blot和ELISA检测其抗原性及与人群血清IgG的反应水平.结果显示,成功对户尘螨种群进行克隆化培养.获得14个核苷酸多样性位点,对应的两个不同序列的重组Der p 2蛋白与鼠单抗1D8的亲和力不同,但与上海地区人群IgG结合力相似(r=0.864).检测不同地区尘螨主要变应原的序列多样性,有助于开发更有针对性的疫苗组分,以及特异性保护性IgG的筛选.
剋隆化培養上海地區戶塵螨,穫得不同編碼序列的重組Der p 2變應原進行噹地人群血清特異性IgG分析,探討其應用價值.從過敏性疾病患者床褥採集分離戶塵螨,採用封閉式培養繫統進行培養,分離培養單箇孕螨穫得剋隆化的螨群.用RT-PCR的方法擴增不同螨剋隆的Der p 2編碼基因,插入原覈錶達載體pET-19b在大腸桿菌內進行錶達,所穫得的蛋白經Dot blot和ELISA檢測其抗原性及與人群血清IgG的反應水平.結果顯示,成功對戶塵螨種群進行剋隆化培養.穫得14箇覈苷痠多樣性位點,對應的兩箇不同序列的重組Der p 2蛋白與鼠單抗1D8的親和力不同,但與上海地區人群IgG結閤力相似(r=0.864).檢測不同地區塵螨主要變應原的序列多樣性,有助于開髮更有針對性的疫苗組分,以及特異性保護性IgG的篩選.
극륭화배양상해지구호진만,획득불동편마서렬적중조Der p 2변응원진행당지인군혈청특이성IgG분석,탐토기응용개치.종과민성질병환자상욕채집분리호진만,채용봉폐식배양계통진행배양,분리배양단개잉만획득극륭화적만군.용RT-PCR적방법확증불동만극륭적Der p 2편마기인,삽입원핵표체재체pET-19b재대장간균내진행표체,소획득적단백경Dot blot화ELISA검측기항원성급여인군혈청IgG적반응수평.결과현시,성공대호진만충군진행극륭화배양.획득14개핵감산다양성위점,대응적량개불동서렬적중조Der p 2단백여서단항1D8적친화력불동,단여상해지구인군IgG결합력상사(r=0.864).검측불동지구진만주요변응원적서렬다양성,유조우개발경유침대성적역묘조분,이급특이성보호성IgG적사선.
