基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2006年
6期
593-596
,共4页
段素素%张云%杨帆%王颖%李文辉%王树惠%刘力
段素素%張雲%楊帆%王穎%李文輝%王樹惠%劉力
단소소%장운%양범%왕영%리문휘%왕수혜%류력
Cre重组酶%Cre-loxP条件性基因打靶%腺病毒载体
Cre重組酶%Cre-loxP條件性基因打靶%腺病毒載體
Cre중조매%Cre-loxP조건성기인타파%선병독재체
目的构建Cre-loxP条件性基因敲除系统中Cre酶的重组腺病毒表达载体,作为体细胞条件性基因敲除的基础,并为传统ES细胞条件性基因敲除提供新的选择.方法用pAd-easy系统在大肠杆菌内经同源重组的方法构建Cre酶的复制缺陷型重组腺病毒载体;Western blot方法鉴定Cre蛋白的表达.结果在大肠杆菌内构建出重组腺病毒质粒,在包装细胞系内包装出重组病毒颗粒;测定病毒滴度为106pfu/L;重组病毒在细胞内表达Cre蛋白.结论表达Cre酶的重组腺病毒载体构建成功,阳性重组质粒的鉴定方法得以改进,为进一步的体细胞Cre-loxP条件性基因敲除提供了基础.
目的構建Cre-loxP條件性基因敲除繫統中Cre酶的重組腺病毒錶達載體,作為體細胞條件性基因敲除的基礎,併為傳統ES細胞條件性基因敲除提供新的選擇.方法用pAd-easy繫統在大腸桿菌內經同源重組的方法構建Cre酶的複製缺陷型重組腺病毒載體;Western blot方法鑒定Cre蛋白的錶達.結果在大腸桿菌內構建齣重組腺病毒質粒,在包裝細胞繫內包裝齣重組病毒顆粒;測定病毒滴度為106pfu/L;重組病毒在細胞內錶達Cre蛋白.結論錶達Cre酶的重組腺病毒載體構建成功,暘性重組質粒的鑒定方法得以改進,為進一步的體細胞Cre-loxP條件性基因敲除提供瞭基礎.
목적구건Cre-loxP조건성기인고제계통중Cre매적중조선병독표체재체,작위체세포조건성기인고제적기출,병위전통ES세포조건성기인고제제공신적선택.방법용pAd-easy계통재대장간균내경동원중조적방법구건Cre매적복제결함형중조선병독재체;Western blot방법감정Cre단백적표체.결과재대장간균내구건출중조선병독질립,재포장세포계내포장출중조병독과립;측정병독적도위106pfu/L;중조병독재세포내표체Cre단백.결론표체Cre매적중조선병독재체구건성공,양성중조질립적감정방법득이개진,위진일보적체세포Cre-loxP조건성기인고제제공료기출.
