中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2008年
3期
537-542
,共6页
柏芸%杜贻鹏%骆晓枫%米洋%袁广卿%何霞%陈展辉%周俊宜
柏蕓%杜貽鵬%駱曉楓%米洋%袁廣卿%何霞%陳展輝%週俊宜
백예%두이붕%락효풍%미양%원엄경%하하%진전휘%주준의
RNA干扰%四环素可诱导RNAi系统%端粒%末端转移酶%细胞凋亡%TREx-HeLa细胞
RNA榦擾%四環素可誘導RNAi繫統%耑粒%末耑轉移酶%細胞凋亡%TREx-HeLa細胞
RNA간우%사배소가유도RNAi계통%단립%말단전이매%세포조망%TREx-HeLa세포
目的:建立可诱导性沉默hTERT的RNA干扰系统,并初步探讨端粒酶与细胞增殖调控之间的关系.方法:构建沉默端粒酶催化亚基hTERT的Tet-on可诱导性RNAi载体psiRNA-hH1/TO-hTERTshRNA,并稳定转染表达TR的TREx-HeLa细胞,用半定量RT-PCR检测hTERT的转录后水平,TRAP法检测端粒酶活性.MTT法检测细胞的增殖,流式细胞仪和Hoechst33342染色法观察细胞凋亡.结果:构建了可诱导性沉默端粒酶催化亚基hTERT的重组体psiRNA-hH1/TO-hTERTshRNA,并建立了可诱导性沉默hTERT的TREx-HeLa细胞株.短期内的端粒酶活性降低后TREx-HeLa细胞生长增殖有下降趋势,而其凋亡情况则未见明显变化.结论:本研究建立了可诱导沉默hTERT的RNAi系统,为研究端粒酶活性与细胞增殖和衰老的关系提供了实验基础.
目的:建立可誘導性沉默hTERT的RNA榦擾繫統,併初步探討耑粒酶與細胞增殖調控之間的關繫.方法:構建沉默耑粒酶催化亞基hTERT的Tet-on可誘導性RNAi載體psiRNA-hH1/TO-hTERTshRNA,併穩定轉染錶達TR的TREx-HeLa細胞,用半定量RT-PCR檢測hTERT的轉錄後水平,TRAP法檢測耑粒酶活性.MTT法檢測細胞的增殖,流式細胞儀和Hoechst33342染色法觀察細胞凋亡.結果:構建瞭可誘導性沉默耑粒酶催化亞基hTERT的重組體psiRNA-hH1/TO-hTERTshRNA,併建立瞭可誘導性沉默hTERT的TREx-HeLa細胞株.短期內的耑粒酶活性降低後TREx-HeLa細胞生長增殖有下降趨勢,而其凋亡情況則未見明顯變化.結論:本研究建立瞭可誘導沉默hTERT的RNAi繫統,為研究耑粒酶活性與細胞增殖和衰老的關繫提供瞭實驗基礎.
목적:건립가유도성침묵hTERT적RNA간우계통,병초보탐토단립매여세포증식조공지간적관계.방법:구건침묵단립매최화아기hTERT적Tet-on가유도성RNAi재체psiRNA-hH1/TO-hTERTshRNA,병은정전염표체TR적TREx-HeLa세포,용반정량RT-PCR검측hTERT적전록후수평,TRAP법검측단립매활성.MTT법검측세포적증식,류식세포의화Hoechst33342염색법관찰세포조망.결과:구건료가유도성침묵단립매최화아기hTERT적중조체psiRNA-hH1/TO-hTERTshRNA,병건립료가유도성침묵hTERT적TREx-HeLa세포주.단기내적단립매활성강저후TREx-HeLa세포생장증식유하강추세,이기조망정황칙미견명현변화.결론:본연구건립료가유도침묵hTERT적RNAi계통,위연구단립매활성여세포증식화쇠로적관계제공료실험기출.
