SV40T/LoxP等外源性基因修饰与肝细胞永生化的研究
SV40T/LoxP등외원성기인수식여간세포영생화적연구
Study on gene modification such as SV40T/LoxP with immortalized liver cell
  • 万方数据
    江西医药 강서의약
    JIANGXI MEDICAL JOURNAL
    2008年 7期 656-659 ,共4页

    李炜%余卫业%姚思敏%张振宇%李美中%傅佳鹏%黄华%王平

    리위%여위업%요사민%장진우%리미중%부가붕%황화%왕평

    永生化%肝细胞%基因%SV40T 永生化%肝細胞%基因%SV40T
    영생화%간세포%기인%SV40T
    目的 构建永生化肝细胞系,观察其生长状态及检测其相关生物免疫学特性.方法 拟利用基因重组克隆方法构建含有sv40T、EGFP基因片段以及LoxP序列,插入Cre基因片段,采用脂质体转染法将新载体pSV-GFP-Cre-LOX转染至来源于成人原代供肝细胞,建立新型肝细胞体系进行细胞培养;利用转化肝细胞能够表达绿色荧光蛋白特性观察该体系中转化肝细胞的生长状况,最后通过系列生化免疫反应检验转化肝细胞的生化免疫学特性;通过Cre重组酶定点切割导入的SV40T基因使转化肝细胞回复到永生化前的状态,并检测其细胞学相关特性.结果 转染SV40T基因的肝细胞具备正常肝细胞生物学特性,且增殖较快,体外易培养.结论 新建永生化肝细胞系可以为进一步肝细胞移植提供理想细胞材料作出研究基础.
    목적 구건영생화간세포계,관찰기생장상태급검측기상관생물면역학특성.방법 의이용기인중조극륭방법구건함유sv40T、EGFP기인편단이급LoxP서렬,삽입Cre기인편단,채용지질체전염법장신재체pSV-GFP-Cre-LOX전염지래원우성인원대공간세포,건립신형간세포체계진행세포배양;이용전화간세포능구표체록색형광단백특성관찰해체계중전화간세포적생장상황,최후통과계렬생화면역반응검험전화간세포적생화면역학특성;통과Cre중조매정점절할도입적SV40T기인사전화간세포회복도영생화전적상태,병검측기세포학상관특성.결과 전염SV40T기인적간세포구비정상간세포생물학특성,차증식교쾌,체외역배양.결론 신건영생화간세포계가이위진일보간세포이식제공이상세포재료작출연구기출.
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