复旦学报（自然科学版）
複旦學報（自然科學版）
복단학보（자연과학판）
JOURNAL OF FUDAN UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE)
2008年
3期
311-317
,共7页
陈莹%袁汉英%李海%吕红
陳瑩%袁漢英%李海%呂紅
진형%원한영%리해%려홍
毕赤酵母%重组人血清白蛋白%蛋白降解%YPS1基因
畢赤酵母%重組人血清白蛋白%蛋白降解%YPS1基因
필적효모%중조인혈청백단백%단백강해%YPS1기인
重组人血清白蛋白在毕赤酵母系统的分泌表达产物除了完整的重组人血清白蛋白外,还存在一约45 ku大小的主要降解片段,直接影响了重组人血清白蛋白的产量和后续的纯化研究.为了减少重组人血清白蛋白的降解,采用同源重组的方法,使毕赤酵母中蛋白酶基因YPS1失活,构建获得蛋白酶缺陷型菌株,研究YPS1基因失活后对重组人血清白蛋白降解的影响.结果表明,毕赤酵母YPS1基因的失活有效地减少了重组人血清白蛋白的降解,完整的重组人血清白蛋白在总蛋白中的比例由原来的60%提高到88%,降解片段由原先的40%降低到10%左右.
重組人血清白蛋白在畢赤酵母繫統的分泌錶達產物除瞭完整的重組人血清白蛋白外,還存在一約45 ku大小的主要降解片段,直接影響瞭重組人血清白蛋白的產量和後續的純化研究.為瞭減少重組人血清白蛋白的降解,採用同源重組的方法,使畢赤酵母中蛋白酶基因YPS1失活,構建穫得蛋白酶缺陷型菌株,研究YPS1基因失活後對重組人血清白蛋白降解的影響.結果錶明,畢赤酵母YPS1基因的失活有效地減少瞭重組人血清白蛋白的降解,完整的重組人血清白蛋白在總蛋白中的比例由原來的60%提高到88%,降解片段由原先的40%降低到10%左右.
중조인혈청백단백재필적효모계통적분비표체산물제료완정적중조인혈청백단백외,환존재일약45 ku대소적주요강해편단,직접영향료중조인혈청백단백적산량화후속적순화연구.위료감소중조인혈청백단백적강해,채용동원중조적방법,사필적효모중단백매기인YPS1실활,구건획득단백매결함형균주,연구YPS1기인실활후대중조인혈청백단백강해적영향.결과표명,필적효모YPS1기인적실활유효지감소료중조인혈청백단백적강해,완정적중조인혈청백단백재총단백중적비례유원래적60%제고도88%,강해편단유원선적40%강저도10%좌우.
