中国实验血液学杂志
中國實驗血液學雜誌
중국실험혈액학잡지
JOURNAL OF EXPERIMENTAL HEMATOLOGY
2009年
1期
49-53
,共5页
梁洁芳%陈滢%叶铁真%何映谊%何新荣%林丽丹%高赛君
樑潔芳%陳瀅%葉鐵真%何映誼%何新榮%林麗丹%高賽君
량길방%진형%협철진%하영의%하신영%림려단%고새군
ERMAP%siRNA%Ara-C%红系分化%K562细胞
ERMAP%siRNA%Ara-C%紅繫分化%K562細胞
ERMAP%siRNA%Ara-C%홍계분화%K562세포
为探讨人类ERMAP基因在红细胞分化发育过程中的作用,本研究设计ERMAP-dsDNA,制备ERMAP-shRNA表达质粒,并建立稳定表达ERMAP-shRNA的K562细胞系(即ERMAP-shRNA/K562细胞系),观察Ara-C诱导ERMAP-shRNA/K562细胞向红细胞系分化过程中,细胞形态、联苯胺染色细胞阳性率和细胞表面标记等的变化,同时以FQ-PCR检测K562细胞人类ERMAP基因表达量的变化.结果发现:经Ara-C诱导72小时,ERMAP-shRNA/K562细胞与对照组比较,体积较大,胞浆量较少,着色大部分呈深蓝色或蓝紫色,部分细胞仍可见1-2个核仁;联苯胺染色阳性率由1.17%增加至2.04%(P<0.05),但仍低于Ara-C诱导K562组(P<0.05);CD36-/CD235a+细胞比例从8.83%增至11.28%,CD36+/CD235a+细胞比例从1.23%增至2.64%,CD36+/CD235a-细胞比例从0.59%增至1.47%,均明显低于Ara-C诱导K562细胞组;与此同时,ERMAP-shRNA/K562细胞ERMAP基因的表达量从诱导前的2.52×10-3缓慢增加至诱导72小时后的4.53×10-3,明显低于K562细胞组.结论:ERMAP-shRNA可抑制Ara-C诱导K562细胞向红系分化的过程,这进一步提示人类ERMAP基因与红细胞分化发育过程有关.
為探討人類ERMAP基因在紅細胞分化髮育過程中的作用,本研究設計ERMAP-dsDNA,製備ERMAP-shRNA錶達質粒,併建立穩定錶達ERMAP-shRNA的K562細胞繫(即ERMAP-shRNA/K562細胞繫),觀察Ara-C誘導ERMAP-shRNA/K562細胞嚮紅細胞繫分化過程中,細胞形態、聯苯胺染色細胞暘性率和細胞錶麵標記等的變化,同時以FQ-PCR檢測K562細胞人類ERMAP基因錶達量的變化.結果髮現:經Ara-C誘導72小時,ERMAP-shRNA/K562細胞與對照組比較,體積較大,胞漿量較少,著色大部分呈深藍色或藍紫色,部分細胞仍可見1-2箇覈仁;聯苯胺染色暘性率由1.17%增加至2.04%(P<0.05),但仍低于Ara-C誘導K562組(P<0.05);CD36-/CD235a+細胞比例從8.83%增至11.28%,CD36+/CD235a+細胞比例從1.23%增至2.64%,CD36+/CD235a-細胞比例從0.59%增至1.47%,均明顯低于Ara-C誘導K562細胞組;與此同時,ERMAP-shRNA/K562細胞ERMAP基因的錶達量從誘導前的2.52×10-3緩慢增加至誘導72小時後的4.53×10-3,明顯低于K562細胞組.結論:ERMAP-shRNA可抑製Ara-C誘導K562細胞嚮紅繫分化的過程,這進一步提示人類ERMAP基因與紅細胞分化髮育過程有關.
위탐토인류ERMAP기인재홍세포분화발육과정중적작용,본연구설계ERMAP-dsDNA,제비ERMAP-shRNA표체질립,병건립은정표체ERMAP-shRNA적K562세포계(즉ERMAP-shRNA/K562세포계),관찰Ara-C유도ERMAP-shRNA/K562세포향홍세포계분화과정중,세포형태、련분알염색세포양성솔화세포표면표기등적변화,동시이FQ-PCR검측K562세포인류ERMAP기인표체량적변화.결과발현:경Ara-C유도72소시,ERMAP-shRNA/K562세포여대조조비교,체적교대,포장량교소,착색대부분정심람색혹람자색,부분세포잉가견1-2개핵인;련분알염색양성솔유1.17%증가지2.04%(P<0.05),단잉저우Ara-C유도K562조(P<0.05);CD36-/CD235a+세포비례종8.83%증지11.28%,CD36+/CD235a+세포비례종1.23%증지2.64%,CD36+/CD235a-세포비례종0.59%증지1.47%,균명현저우Ara-C유도K562세포조;여차동시,ERMAP-shRNA/K562세포ERMAP기인적표체량종유도전적2.52×10-3완만증가지유도72소시후적4.53×10-3,명현저우K562세포조.결론:ERMAP-shRNA가억제Ara-C유도K562세포향홍계분화적과정,저진일보제시인류ERMAP기인여홍세포분화발육과정유관.