军事医学科学院院刊
軍事醫學科學院院刊
군사의학과학원원간
BULLETIN OF THE ACADEMY OF MILITARY MEDICAL SCIENCES
2010年
2期
156-159
,共4页
刘高媛%余祖胤%善亚君%柳晓兰%赵振虎%赵勤实%陈丁丁%从玉文
劉高媛%餘祖胤%善亞君%柳曉蘭%趙振虎%趙勤實%陳丁丁%從玉文
류고원%여조윤%선아군%류효란%조진호%조근실%진정정%종옥문
7-乙酰基-鲁山冬凌草甲素%HL-60细胞%细胞增殖%细胞周期阻滞%活性氧%白血病
7-乙酰基-魯山鼕凌草甲素%HL-60細胞%細胞增殖%細胞週期阻滯%活性氧%白血病
7-을선기-로산동릉초갑소%HL-60세포%세포증식%세포주기조체%활성양%백혈병
目的 研究7-乙酰基-鲁山冬凌草甲素(7-acetyl-lushanrubescensin A,ARA)对人急性髓系白血病细胞株HL-60的细胞增殖和细胞周期的影响,并对其作用机制进行探讨.方法 MTT法检测ARA对HL-60细胞增殖的影响;在ARA作用HL-60细胞不同时间后,流式细胞仪检测细胞周期变化;Western印迹检测周期相关蛋白Rb、p(phospho)-Rb(ser795)、p-Rb(ser807/811),细胞周期蛋白(cyclin)D1、cyclin D3、cyclin E2、CDK4及CDK6的蛋白表达;流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)水平.结果 ARA剂量依赖性地抑制HL-60细胞增殖,48 h的IC50为(1.96±0.08)μmol/L.ARA诱导HL-60细胞发生明显的细胞周期G0/G1阻滞,具有时间和浓度依赖性.机制研究显示ARA引起Rb总蛋白出现移行条带,并抑制p-Rb(ser795)位点磷酸化,显著抑制CDK4的蛋白表达,并部分降低cyclin D3和cyclin E2的表达水平,但对cyclin D1和CDK6的作用则不明显.此外,ARA显著增加HL-60细胞内ROS水平,而抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)能够阻断ARA诱导的ROS升高及细胞周期阻滞.结论 ARA能够明显抑制白血病细胞增殖,诱导细胞周期阻滞,其机制可能与抑制Rb活化和降低cyclin D3、cyclin E2和CDK4的表达水平相关,并且ROS在ARA介导的生物学效应中可能有重要作用.
目的 研究7-乙酰基-魯山鼕凌草甲素(7-acetyl-lushanrubescensin A,ARA)對人急性髓繫白血病細胞株HL-60的細胞增殖和細胞週期的影響,併對其作用機製進行探討.方法 MTT法檢測ARA對HL-60細胞增殖的影響;在ARA作用HL-60細胞不同時間後,流式細胞儀檢測細胞週期變化;Western印跡檢測週期相關蛋白Rb、p(phospho)-Rb(ser795)、p-Rb(ser807/811),細胞週期蛋白(cyclin)D1、cyclin D3、cyclin E2、CDK4及CDK6的蛋白錶達;流式細胞儀檢測細胞內活性氧(ROS)水平.結果 ARA劑量依賴性地抑製HL-60細胞增殖,48 h的IC50為(1.96±0.08)μmol/L.ARA誘導HL-60細胞髮生明顯的細胞週期G0/G1阻滯,具有時間和濃度依賴性.機製研究顯示ARA引起Rb總蛋白齣現移行條帶,併抑製p-Rb(ser795)位點燐痠化,顯著抑製CDK4的蛋白錶達,併部分降低cyclin D3和cyclin E2的錶達水平,但對cyclin D1和CDK6的作用則不明顯.此外,ARA顯著增加HL-60細胞內ROS水平,而抗氧化劑N-乙酰半胱氨痠(NAC)能夠阻斷ARA誘導的ROS升高及細胞週期阻滯.結論 ARA能夠明顯抑製白血病細胞增殖,誘導細胞週期阻滯,其機製可能與抑製Rb活化和降低cyclin D3、cyclin E2和CDK4的錶達水平相關,併且ROS在ARA介導的生物學效應中可能有重要作用.
목적 연구7-을선기-로산동릉초갑소(7-acetyl-lushanrubescensin A,ARA)대인급성수계백혈병세포주HL-60적세포증식화세포주기적영향,병대기작용궤제진행탐토.방법 MTT법검측ARA대HL-60세포증식적영향;재ARA작용HL-60세포불동시간후,류식세포의검측세포주기변화;Western인적검측주기상관단백Rb、p(phospho)-Rb(ser795)、p-Rb(ser807/811),세포주기단백(cyclin)D1、cyclin D3、cyclin E2、CDK4급CDK6적단백표체;류식세포의검측세포내활성양(ROS)수평.결과 ARA제량의뢰성지억제HL-60세포증식,48 h적IC50위(1.96±0.08)μmol/L.ARA유도HL-60세포발생명현적세포주기G0/G1조체,구유시간화농도의뢰성.궤제연구현시ARA인기Rb총단백출현이행조대,병억제p-Rb(ser795)위점린산화,현저억제CDK4적단백표체,병부분강저cyclin D3화cyclin E2적표체수평,단대cyclin D1화CDK6적작용칙불명현.차외,ARA현저증가HL-60세포내ROS수평,이항양화제N-을선반광안산(NAC)능구조단ARA유도적ROS승고급세포주기조체.결론 ARA능구명현억제백혈병세포증식,유도세포주기조체,기궤제가능여억제Rb활화화강저cyclin D3、cyclin E2화CDK4적표체수평상관,병차ROS재ARA개도적생물학효응중가능유중요작용.
