小鼠内耳圆窗基因导入的实验研究
소서내이원창기인도입적실험연구
Gene Delivery through Round Window Membrane in Mouse Inner Ear
  • 万方数据
    听力学及言语疾病杂志 은역학급언어질병잡지
    JOURNAL OF AUDIOLOGY AND SPEECH PATHOLOGY
    2010年 4期 347-350 ,共4页

    朱光洁%徐琳%高下%陈杰%丁小琼%麻晓峰%陆玲%秦小明%周函%崔昕燕

    주광길%서림%고하%진걸%정소경%마효봉%륙령%진소명%주함%최흔연

    基因转导%圆窗%腺病毒%小鼠%EGFP 基因轉導%圓窗%腺病毒%小鼠%EGFP
    기인전도%원창%선병독%소서%EGFP
    目的 研究携带增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)腺病毒(Ad-EG-FP)经由小鼠耳后圆窗径路导入内耳的可行性,分析EGFP在耳蜗内的表达特点.方法 19只健康的8～9周龄C57BL/6J雄性小鼠随机分为三组:Ad-EGFP组7只,人工外淋巴液组6只,两组通过耳后切口圆窗径路注射,分别导入Ad-EGFP和人工外淋巴液;空白对照组6只,未予处理.各组均于术前3日和术后7日行听性脑干反应(ABR)检查;术后7日取出耳蜗于荧光显微镜下观察EGFP在内耳的分布并行免疫组化观察EGFP在基底膜的表达.结果 3组动物术前ABR反应阈差异无统计学意义(P＞0.05),术后7日,Ad-EGFP组ABR反应阈为62.86±9.94 dB SPL,人工外淋巴液组ABR反应阈为60.83±9.70 dB SPL,均较术前(37.86±8.59和34.16±8.04 dB SPL)及空白对照组(40.83±8.61 dBSPL)高(P值均＜0.05);空白对照组实验前后ABR反应阈无变化,Ad-EGFP组与人工外淋巴液组术后7天ABR反应阔差异无统计学意义(P值均＜0.05).Ad-EGFP组Ad-EGFP导入后在基底膜上可见EGFP呈广泛表达,人工外淋巴液组和空白对照组基底膜未见荧光表达.结论 外源性基因可经内耳圆窗导入并在耳蜗基底膜上广泛表达.
    목적 연구휴대증강형록색형광단백(enhanced green fluorescent protein,EGFP)선병독(Ad-EG-FP)경유소서이후원창경로도입내이적가행성,분석EGFP재이와내적표체특점.방법 19지건강적8～9주령C57BL/6J웅성소서수궤분위삼조:Ad-EGFP조7지,인공외림파액조6지,량조통과이후절구원창경로주사,분별도입Ad-EGFP화인공외림파액;공백대조조6지,미여처리.각조균우술전3일화술후7일행은성뇌간반응(ABR)검사;술후7일취출이와우형광현미경하관찰EGFP재내이적분포병행면역조화관찰EGFP재기저막적표체.결과 3조동물술전ABR반응역차이무통계학의의(P＞0.05),술후7일,Ad-EGFP조ABR반응역위62.86±9.94 dB SPL,인공외림파액조ABR반응역위60.83±9.70 dB SPL,균교술전(37.86±8.59화34.16±8.04 dB SPL)급공백대조조(40.83±8.61 dBSPL)고(P치균＜0.05);공백대조조실험전후ABR반응역무변화,Ad-EGFP조여인공외림파액조술후7천ABR반응활차이무통계학의의(P치균＜0.05).Ad-EGFP조Ad-EGFP도입후재기저막상가견EGFP정엄범표체,인공외림파액조화공백대조조기저막미견형광표체.결론 외원성기인가경내이원창도입병재이와기저막상엄범표체.
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