中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2010年
9期
708-711
,共4页
徐佳%邵昱昊%韩宗玺%李慧昕%孔宪刚%刘胜旺
徐佳%邵昱昊%韓宗璽%李慧昕%孔憲剛%劉勝旺
서가%소욱호%한종새%리혜흔%공헌강%류성왕
鸡传染性支气管炎病毒%核蛋白%单克隆抗体%线性表位
鷄傳染性支氣管炎病毒%覈蛋白%單剋隆抗體%線性錶位
계전염성지기관염병독%핵단백%단극륭항체%선성표위
为鉴定鸡传染性支气管炎病毒(IBV)抗原表位,本研究将IBV tl/CH/LDT3/03株免疫BALB/c小鼠,将其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经克隆筛选,得到两株针对IBV核(N)蛋白的单克隆抗体(MAb)6H3和6F9,其染色体数目分别为90条和102条,MAb亚类鉴定分别属于IgG1和IgG2b,轻链均为κ链.对MAb 6H3和6F9的抗原表位进行初步鉴定,将N基因分成8个片段克隆于pGEX-6p-1载体中,转化BL21(DE3)内诱导表达.经western blot分析,MAb 6H3表位的初步定位在aa 80～aa 99,而MAb 6F9表位的初步定位在aa 64～aa 82.而且MAb 6F9还能特异性识别其他5株IBV的天然N蛋白,推测它们含有一个相同的B细胞表位.
為鑒定鷄傳染性支氣管炎病毒(IBV)抗原錶位,本研究將IBV tl/CH/LDT3/03株免疫BALB/c小鼠,將其脾細胞與SP2/0骨髓瘤細胞融閤,經剋隆篩選,得到兩株針對IBV覈(N)蛋白的單剋隆抗體(MAb)6H3和6F9,其染色體數目分彆為90條和102條,MAb亞類鑒定分彆屬于IgG1和IgG2b,輕鏈均為κ鏈.對MAb 6H3和6F9的抗原錶位進行初步鑒定,將N基因分成8箇片段剋隆于pGEX-6p-1載體中,轉化BL21(DE3)內誘導錶達.經western blot分析,MAb 6H3錶位的初步定位在aa 80～aa 99,而MAb 6F9錶位的初步定位在aa 64～aa 82.而且MAb 6F9還能特異性識彆其他5株IBV的天然N蛋白,推測它們含有一箇相同的B細胞錶位.
위감정계전염성지기관염병독(IBV)항원표위,본연구장IBV tl/CH/LDT3/03주면역BALB/c소서,장기비세포여SP2/0골수류세포융합,경극륭사선,득도량주침대IBV핵(N)단백적단극륭항체(MAb)6H3화6F9,기염색체수목분별위90조화102조,MAb아류감정분별속우IgG1화IgG2b,경련균위κ련.대MAb 6H3화6F9적항원표위진행초보감정,장N기인분성8개편단극륭우pGEX-6p-1재체중,전화BL21(DE3)내유도표체.경western blot분석,MAb 6H3표위적초보정위재aa 80～aa 99,이MAb 6F9표위적초보정위재aa 64～aa 82.이차MAb 6F9환능특이성식별기타5주IBV적천연N단백,추측타문함유일개상동적B세포표위.
