中国全科医学
中國全科醫學
중국전과의학
CHINESE GENERAL PRACTICE
2011年
33期
3833-3836
,共4页
低氧诱导因子-1α%低氧诱导因子-2α%肺腺癌细胞%细胞低氧
低氧誘導因子-1α%低氧誘導因子-2α%肺腺癌細胞%細胞低氧
저양유도인자-1α%저양유도인자-2α%폐선암세포%세포저양
目的 探讨低氧对肺腺癌细胞SPCA-1低氧诱导因子-lα(HIF-lα)和低氧诱导因子-2α(HIF-2α)的差异性调控作用及其原因.方法 体外培养肺腺癌细胞系SPCA-1细胞在常氧、低氧条件下培养不同时间,采用RT-PCR和Western blot检测低氧对HIF-2α和HIF-lα基因的激活作用.通过加入线粒体活性氧族阻断剂观察低氧对HIF-2α和HIF-lα蛋白表达的影响,探讨其表达调控的机制.结果 正常氧条件下,SPCA-1整细胞提取物和细胞核提取物中,HIF-1α几乎不表达,HIF-2α在整细胞提取物中有少量表达,但在细胞核提取物中无明显表达.经低氧(0.5% O2)处理4 h后,HIF-2α和HIF-1α蛋白均明显增多;HIF-2α和HIF-1α蛋白与细胞浓度、氧浓度有关;HIF-1α蛋白在低氧4 h后增加,6 h后显著降低,而HIF-2α蛋白低氧4 h增加后并保持于此水平.HIF-1α mRNA水平在低氧6~12 h时降低,而HIF-2α mRNA表达持续升高;经线粒体活性氧族阻断剂鱼藤酮、二亚苯基碘鎓和粘噻唑菌醇处理4 h后,HIF-2α和HIF-lα蛋白水平明显降低.结论 低氧可在肺腺癌细胞诱导HIF-1α和HIF-2α基因表达;HIF-2α与HIF-1α的mRNA和蛋白水平在细胞低氧适应反应的不同时段有所不同,翻译后修饰在低氧对HIF-1α和HIF-2α的诱导中发挥重要作用;低氧很可能是通过相同的信号通路发挥对HIF-2α和HIF-1α的诱导调控作用.
目的 探討低氧對肺腺癌細胞SPCA-1低氧誘導因子-lα(HIF-lα)和低氧誘導因子-2α(HIF-2α)的差異性調控作用及其原因.方法 體外培養肺腺癌細胞繫SPCA-1細胞在常氧、低氧條件下培養不同時間,採用RT-PCR和Western blot檢測低氧對HIF-2α和HIF-lα基因的激活作用.通過加入線粒體活性氧族阻斷劑觀察低氧對HIF-2α和HIF-lα蛋白錶達的影響,探討其錶達調控的機製.結果 正常氧條件下,SPCA-1整細胞提取物和細胞覈提取物中,HIF-1α幾乎不錶達,HIF-2α在整細胞提取物中有少量錶達,但在細胞覈提取物中無明顯錶達.經低氧(0.5% O2)處理4 h後,HIF-2α和HIF-1α蛋白均明顯增多;HIF-2α和HIF-1α蛋白與細胞濃度、氧濃度有關;HIF-1α蛋白在低氧4 h後增加,6 h後顯著降低,而HIF-2α蛋白低氧4 h增加後併保持于此水平.HIF-1α mRNA水平在低氧6~12 h時降低,而HIF-2α mRNA錶達持續升高;經線粒體活性氧族阻斷劑魚籐酮、二亞苯基碘鎓和粘噻唑菌醇處理4 h後,HIF-2α和HIF-lα蛋白水平明顯降低.結論 低氧可在肺腺癌細胞誘導HIF-1α和HIF-2α基因錶達;HIF-2α與HIF-1α的mRNA和蛋白水平在細胞低氧適應反應的不同時段有所不同,翻譯後脩飾在低氧對HIF-1α和HIF-2α的誘導中髮揮重要作用;低氧很可能是通過相同的信號通路髮揮對HIF-2α和HIF-1α的誘導調控作用.
목적 탐토저양대폐선암세포SPCA-1저양유도인자-lα(HIF-lα)화저양유도인자-2α(HIF-2α)적차이성조공작용급기원인.방법 체외배양폐선암세포계SPCA-1세포재상양、저양조건하배양불동시간,채용RT-PCR화Western blot검측저양대HIF-2α화HIF-lα기인적격활작용.통과가입선립체활성양족조단제관찰저양대HIF-2α화HIF-lα단백표체적영향,탐토기표체조공적궤제.결과 정상양조건하,SPCA-1정세포제취물화세포핵제취물중,HIF-1α궤호불표체,HIF-2α재정세포제취물중유소량표체,단재세포핵제취물중무명현표체.경저양(0.5% O2)처리4 h후,HIF-2α화HIF-1α단백균명현증다;HIF-2α화HIF-1α단백여세포농도、양농도유관;HIF-1α단백재저양4 h후증가,6 h후현저강저,이HIF-2α단백저양4 h증가후병보지우차수평.HIF-1α mRNA수평재저양6~12 h시강저,이HIF-2α mRNA표체지속승고;경선립체활성양족조단제어등동、이아분기전옹화점새서균순처리4 h후,HIF-2α화HIF-lα단백수평명현강저.결론 저양가재폐선암세포유도HIF-1α화HIF-2α기인표체;HIF-2α여HIF-1α적mRNA화단백수평재세포저양괄응반응적불동시단유소불동,번역후수식재저양대HIF-1α화HIF-2α적유도중발휘중요작용;저양흔가능시통과상동적신호통로발휘대HIF-2α화HIF-1α적유도조공작용.
