中国医科大学学报
中國醫科大學學報
중국의과대학학보
JOURNAL OF CHINA MEDICAL UNIVERSITY
2011年
7期
600-604
,共5页
陈毅%尹西盟%董宝铁%范仲凯%刘丹平%屠冠军
陳毅%尹西盟%董寶鐵%範仲凱%劉丹平%屠冠軍
진의%윤서맹%동보철%범중개%류단평%도관군
骨髓间充质干细胞%PTEN基因%RNA干扰%氧糖剥夺模型%Bcl-2蛋白
骨髓間充質榦細胞%PTEN基因%RNA榦擾%氧糖剝奪模型%Bcl-2蛋白
골수간충질간세포%PTEN기인%RNA간우%양당박탈모형%Bcl-2단백
目的 研究RNA干扰沉默第10号染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白(PTEN)基因对骨髓间充质干细胞(BMSC)氧糖剥夺模型的保护作用,并探讨其对Bcl-2敏感的凋亡通路的影响,分析其保护作用的机制.方法体外分离培养BMSC并鉴定,通过脂质体法转染PTEN基因特异的siRNA沉默PTEN基因;RT-PCR检测PTEN基因的表达;制备体外氧糖剥夺模型观察PTEN基因的沉默对细胞的保护作用.Western blot检测Bcl-2蛋白表达的变化.结果成功培养BMSC并鉴定.RT-PCR检测结果显示siRNA成功干扰了PTEN基因的表达,流式细胞仪检测结果显示PTEN基因沉默后的细胞对氧糖剥夺模型有较强的耐受能力,Western blot检测结果显示Bcl-2蛋白明显增多.结论PTEN基因的沉默使BMSC更能耐受氧糖剥夺的环境,增强了细胞的存活能力,其机制可能是通过Bcl-2敏感的凋亡通路抑制细胞凋亡.
目的 研究RNA榦擾沉默第10號染色體同源丟失性燐痠酶張力蛋白(PTEN)基因對骨髓間充質榦細胞(BMSC)氧糖剝奪模型的保護作用,併探討其對Bcl-2敏感的凋亡通路的影響,分析其保護作用的機製.方法體外分離培養BMSC併鑒定,通過脂質體法轉染PTEN基因特異的siRNA沉默PTEN基因;RT-PCR檢測PTEN基因的錶達;製備體外氧糖剝奪模型觀察PTEN基因的沉默對細胞的保護作用.Western blot檢測Bcl-2蛋白錶達的變化.結果成功培養BMSC併鑒定.RT-PCR檢測結果顯示siRNA成功榦擾瞭PTEN基因的錶達,流式細胞儀檢測結果顯示PTEN基因沉默後的細胞對氧糖剝奪模型有較彊的耐受能力,Western blot檢測結果顯示Bcl-2蛋白明顯增多.結論PTEN基因的沉默使BMSC更能耐受氧糖剝奪的環境,增彊瞭細胞的存活能力,其機製可能是通過Bcl-2敏感的凋亡通路抑製細胞凋亡.
목적 연구RNA간우침묵제10호염색체동원주실성린산매장력단백(PTEN)기인대골수간충질간세포(BMSC)양당박탈모형적보호작용,병탐토기대Bcl-2민감적조망통로적영향,분석기보호작용적궤제.방법체외분리배양BMSC병감정,통과지질체법전염PTEN기인특이적siRNA침묵PTEN기인;RT-PCR검측PTEN기인적표체;제비체외양당박탈모형관찰PTEN기인적침묵대세포적보호작용.Western blot검측Bcl-2단백표체적변화.결과성공배양BMSC병감정.RT-PCR검측결과현시siRNA성공간우료PTEN기인적표체,류식세포의검측결과현시PTEN기인침묵후적세포대양당박탈모형유교강적내수능력,Western blot검측결과현시Bcl-2단백명현증다.결론PTEN기인적침묵사BMSC경능내수양당박탈적배경,증강료세포적존활능력,기궤제가능시통과Bcl-2민감적조망통로억제세포조망.