CAJ | 학술논문

目的钙激活Cl-通道(CLCA)家族中小鼠mCLCA3与人hCLCA1是异种同源蛋白,两者表达于气道上皮杯状细胞.拟探讨hCLCA1 DNA疫苗对哮喘小鼠气道黏液高分泌状况的影响.方法构建重组真核表达质粒pSecTag2B/hCLCA1,将其作为疫苗肌注法接种给BALB/c小鼠(隔2周1次,共4次).当酶联免疫吸附法(ELISA)证实血清中有能结合mCLCA3胞外肽段(ED)的抗体产生时,卵蛋白致敏法制备接种小鼠的哮喘模型.引喘5 d后,PAS特染黏蛋白法观察气道杯状细胞数量及分泌功能,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测黏蛋白MUC5AC mRNA水平的变化.设接种pSecTag2B/mCLCA3、空载体pSecTag2B和生理盐水为对照组.结果 ELISA证实疫苗接种3次后的小鼠血清抗体,能有效结合mCLCA3的3个ED.其中抗体与N-端和C-端ED的结合滴度大于与中间ED的结合滴度.与同样被诱发哮喘的对照组相比,疫苗接种组小鼠气道的杯状细胞数量和黏液分泌量明显减少,MUC5AC mRNA转录水平下降. 结论 hCLCA1 DNA疫苗能诱导小鼠产生结合自身mCLCA3胞外肽段的抗体,并因此有效减轻了哮喘气道黏液高分泌.
목적개격활Cl-통도(CLCA)가족중소서mCLCA3여인hCLCA1시이충동원단백,량자표체우기도상피배상세포.의탐토hCLCA1 DNA역묘대효천소서기도점액고분비상황적영향.방법구건중조진핵표체질립pSecTag2B/hCLCA1,장기작위역묘기주법접충급BALB/c소서(격2주1차,공4차).당매련면역흡부법(ELISA)증실혈청중유능결합mCLCA3포외태단(ED)적항체산생시,란단백치민법제비접충소서적효천모형.인천5 d후,PAS특염점단백법관찰기도배상세포수량급분비공능,역전록-취합매련반응(RT-PCR)법검측점단백MUC5AC mRNA수평적변화.설접충pSecTag2B/mCLCA3、공재체pSecTag2B화생리염수위대조조.결과 ELISA증실역묘접충3차후적소서혈청항체,능유효결합mCLCA3적3개ED.기중항체여N-단화C-단ED적결합적도대우여중간ED적결합적도.여동양피유발효천적대조조상비,역묘접충조소서기도적배상세포수량화점액분비량명현감소,MUC5AC mRNA전록수평하강. 결론 hCLCA1 DNA역묘능유도소서산생결합자신mCLCA3포외태단적항체,병인차유효감경료효천기도점액고분비.