中华显微外科杂志
中華顯微外科雜誌
중화현미외과잡지
Chinese Journal of Microsurgery
2008年
5期
368-370
,共3页
袁凌伟%夏亚一%鲁茂森%邢帅%汉华%沈海丽%王翠芳
袁凌偉%夏亞一%魯茂森%邢帥%漢華%瀋海麗%王翠芳
원릉위%하아일%로무삼%형수%한화%침해려%왕취방
真皮干细胞%体外培养%兔
真皮榦細胞%體外培養%兔
진피간세포%체외배양%토
目的 探讨兔真皮干细胞的体外分离培养和鉴定方法,初步对其生长特性进行研究,并为生物组织工程提供一种新的种子细胞及成熟的分离鉴定方法.方法 以新生新西兰大白兔为研究对象,机械法直接分离得到真皮组织,采用酶消化法获取细胞,利用干细胞贴壁黏附生长的特性获取高克隆细胞群,并进行传代筛选.应用流式细胞技术检测细胞周期,成骨诱导检测其分化潜能,免疫细胞化学法检测细胞表面分子的表达.结果 原代培养的兔真皮细胞经过连续传代培养至第3代,细胞形态均一.流式细胞仪细胞周期分析显示,体外培养3 d时DNA合成前期细胞(G1期)为55.8%,DNA合成期细胞(S期)为34.6%.免疫细胞化学显示:细胞表面波形蛋白(vimentin)、CD34表达阳性,细胞角蛋白19(cytoKeratin19)、Ⅷ因子和巢蛋白(nestin)表达阴性.结论 新生新西兰大白兔真皮组织中存在多能干细胞,该细胞可向成骨细胞分化,具有多向分化潜能.
目的 探討兔真皮榦細胞的體外分離培養和鑒定方法,初步對其生長特性進行研究,併為生物組織工程提供一種新的種子細胞及成熟的分離鑒定方法.方法 以新生新西蘭大白兔為研究對象,機械法直接分離得到真皮組織,採用酶消化法穫取細胞,利用榦細胞貼壁黏附生長的特性穫取高剋隆細胞群,併進行傳代篩選.應用流式細胞技術檢測細胞週期,成骨誘導檢測其分化潛能,免疫細胞化學法檢測細胞錶麵分子的錶達.結果 原代培養的兔真皮細胞經過連續傳代培養至第3代,細胞形態均一.流式細胞儀細胞週期分析顯示,體外培養3 d時DNA閤成前期細胞(G1期)為55.8%,DNA閤成期細胞(S期)為34.6%.免疫細胞化學顯示:細胞錶麵波形蛋白(vimentin)、CD34錶達暘性,細胞角蛋白19(cytoKeratin19)、Ⅷ因子和巢蛋白(nestin)錶達陰性.結論 新生新西蘭大白兔真皮組織中存在多能榦細胞,該細胞可嚮成骨細胞分化,具有多嚮分化潛能.
목적 탐토토진피간세포적체외분리배양화감정방법,초보대기생장특성진행연구,병위생물조직공정제공일충신적충자세포급성숙적분리감정방법.방법 이신생신서란대백토위연구대상,궤계법직접분리득도진피조직,채용매소화법획취세포,이용간세포첩벽점부생장적특성획취고극륭세포군,병진행전대사선.응용류식세포기술검측세포주기,성골유도검측기분화잠능,면역세포화학법검측세포표면분자적표체.결과 원대배양적토진피세포경과련속전대배양지제3대,세포형태균일.류식세포의세포주기분석현시,체외배양3 d시DNA합성전기세포(G1기)위55.8%,DNA합성기세포(S기)위34.6%.면역세포화학현시:세포표면파형단백(vimentin)、CD34표체양성,세포각단백19(cytoKeratin19)、Ⅷ인자화소단백(nestin)표체음성.결론 신생신서란대백토진피조직중존재다능간세포,해세포가향성골세포분화,구유다향분화잠능.
