华北农学报
華北農學報
화북농학보
ACTA AGRICULTURAE BOREALI-SINICA
2009年
4期
88-91
,共4页
乔慧蕾%王瑞刚%郭九峰%孙国琴%李国婧
喬慧蕾%王瑞剛%郭九峰%孫國琴%李國婧
교혜뢰%왕서강%곽구봉%손국금%리국청
脱水素%克隆%植物表达载体%沙冬青
脫水素%剋隆%植物錶達載體%沙鼕青
탈수소%극륭%식물표체재체%사동청
为研究沙冬青脱水素的功能,根据沙冬青cDNA文库中脱水素基因序列设计引物,采用PCR技术进行了脱水素基因的扩增,扩增产物与载体pGM-T载体连接,转化大肠杆菌Top10,筛选阳性克隆,测序结果表明,已成功克隆的阳性重组子经测序鉴定其片段大小与已知沙冬青cDNA文库中脱水素基因大小一致,为760 bp,说明此序列无内含子.将成功克隆的阳性重组子提取质粒与pCAMBIA3301质粒同样进行酶切反应,再以T4DNA连接酶连接,成功构建了脱水素基因的植物表达载体,为下一步的抗逆性研究打下了基础.
為研究沙鼕青脫水素的功能,根據沙鼕青cDNA文庫中脫水素基因序列設計引物,採用PCR技術進行瞭脫水素基因的擴增,擴增產物與載體pGM-T載體連接,轉化大腸桿菌Top10,篩選暘性剋隆,測序結果錶明,已成功剋隆的暘性重組子經測序鑒定其片段大小與已知沙鼕青cDNA文庫中脫水素基因大小一緻,為760 bp,說明此序列無內含子.將成功剋隆的暘性重組子提取質粒與pCAMBIA3301質粒同樣進行酶切反應,再以T4DNA連接酶連接,成功構建瞭脫水素基因的植物錶達載體,為下一步的抗逆性研究打下瞭基礎.
위연구사동청탈수소적공능,근거사동청cDNA문고중탈수소기인서렬설계인물,채용PCR기술진행료탈수소기인적확증,확증산물여재체pGM-T재체련접,전화대장간균Top10,사선양성극륭,측서결과표명,이성공극륭적양성중조자경측서감정기편단대소여이지사동청cDNA문고중탈수소기인대소일치,위760 bp,설명차서렬무내함자.장성공극륭적양성중조자제취질립여pCAMBIA3301질립동양진행매절반응,재이T4DNA련접매련접,성공구건료탈수소기인적식물표체재체,위하일보적항역성연구타하료기출.
