狂犬病病毒修饰基因组的构建
광견병병독수식기인조적구건
Construction of Genomes-Rabies Virus Modified
  • 万方数据
    新疆农业科学 신강농업과학
    XINJIANG AGRICULTURAL SCIENCES
    2010年 6期 1236-1241 ,共6页

    魏玉荣%易忠%符子华%马素贞%简子健%胡尔玛西%王海烽%魏婕%朱晶晶

    위옥영%역충%부자화%마소정%간자건%호이마서%왕해봉%위첩%주정정

    狂犬病病毒%胞质区%Ψ区%同源重组%人细胞色素C基因%反向遗传学 狂犬病病毒%胞質區%Ψ區%同源重組%人細胞色素C基因%反嚮遺傳學
    광견병병독%포질구%Ψ구%동원중조%인세포색소C기인%반향유전학
    [目的]利用反向遗传学技术在DNA水平上构建了狂犬病病毒修饰基因组.[方法]提取狂犬病病毒(Rabies Virus,RV)口服疫苗株SRV9基因组总RNA作为RT-PCR的扩增模板,并根据GenBank已发表的SRV9基因组序列设计引物, 缺失狂犬病基因组Ψ区并在缺失位置插入人细胞色素C基因,再设计引物删除糖蛋白(G)胞质区(CD区).缺失Ψ区及删除CD区时采用基因同源重组的方法进行.在缺失的Ψ区插入人细胞色素C基因时,利用引物引入酶切位点NheI和EcoRI, 用PCR扩增出人细胞色素C基因并插入NheI和EcoRI位点.[结果]获得含预期的人细胞色素C基因,同时缺失了CD区与Ψ区的质粒pBSK- LA.[结论]全基因组测序结果表明已成功构建了狂犬病病毒修饰基因组.
    [목적]이용반향유전학기술재DNA수평상구건료광견병병독수식기인조.[방법]제취광견병병독(Rabies Virus,RV)구복역묘주SRV9기인조총RNA작위RT-PCR적확증모판,병근거GenBank이발표적SRV9기인조서렬설계인물, 결실광견병기인조Ψ구병재결실위치삽입인세포색소C기인,재설계인물산제당단백(G)포질구(CD구).결실Ψ구급산제CD구시채용기인동원중조적방법진행.재결실적Ψ구삽입인세포색소C기인시,이용인물인입매절위점NheI화EcoRI, 용PCR확증출인세포색소C기인병삽입NheI화EcoRI위점.[결과]획득함예기적인세포색소C기인,동시결실료CD구여Ψ구적질립pBSK- LA.[결론]전기인조측서결과표명이성공구건료광견병병독수식기인조.
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