国际眼科杂志
國際眼科雜誌
국제안과잡지
INTERNATIONAL JOURNAL OF OPHTHALMOLOGY
2011年
1期
14-18
,共5页
徐国兴%侯泽江%徐巍%郭健%谢茂松%白月
徐國興%侯澤江%徐巍%郭健%謝茂鬆%白月
서국흥%후택강%서외%곽건%사무송%백월
骨髓间充质干细胞%分化%光感受器细胞
骨髓間充質榦細胞%分化%光感受器細胞
골수간충질간세포%분화%광감수기세포
目的:探索骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)定向分化成光感受器样细胞所需的微环境.方法:采用淋巴细胞分离液梯度离心法分离纯化人BMSCs,培养第3代的细胞以碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、表皮生长因子(EGF)及脑源性神经营养因子(BDNF)3种因子首先进行向神经前体细胞诱导分化,应用免疫细胞化学检测巢蛋白及微管相关蛋白-2,当巢蛋白阳性表达率达到最高时更换诱导因子,加入色素上皮衍生因子(PEDF)及牛磺酸(taurine)继续诱导2~3wk,用免疫细胞化学及RT-PCR法检测视紫红质的表达情况.结果:诱导第3d开始能检测到巢蛋白表达,第12d阳性表达率达到最高,达(90.9±2.6)%.微管相关蛋白-2在诱导后第6d检测到阳性表达.部分细胞形态呈神经元细胞样.第12d诱导因子更换为PEDF及taurine继续诱导2~3wk,检测到有视紫红质表达,第2wk阳性率为(20.7±3.8)%,第3wk阳性率为(89.8±3.7)%.结论:采用分阶段诱导法,应用因子bFGF,GF,DNF及PEDF,aurine能在体外诱导BMSCs表达光感受器细胞标志物视紫红质.
目的:探索骨髓間充質榦細胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)定嚮分化成光感受器樣細胞所需的微環境.方法:採用淋巴細胞分離液梯度離心法分離純化人BMSCs,培養第3代的細胞以堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)、錶皮生長因子(EGF)及腦源性神經營養因子(BDNF)3種因子首先進行嚮神經前體細胞誘導分化,應用免疫細胞化學檢測巢蛋白及微管相關蛋白-2,噹巢蛋白暘性錶達率達到最高時更換誘導因子,加入色素上皮衍生因子(PEDF)及牛磺痠(taurine)繼續誘導2~3wk,用免疫細胞化學及RT-PCR法檢測視紫紅質的錶達情況.結果:誘導第3d開始能檢測到巢蛋白錶達,第12d暘性錶達率達到最高,達(90.9±2.6)%.微管相關蛋白-2在誘導後第6d檢測到暘性錶達.部分細胞形態呈神經元細胞樣.第12d誘導因子更換為PEDF及taurine繼續誘導2~3wk,檢測到有視紫紅質錶達,第2wk暘性率為(20.7±3.8)%,第3wk暘性率為(89.8±3.7)%.結論:採用分階段誘導法,應用因子bFGF,GF,DNF及PEDF,aurine能在體外誘導BMSCs錶達光感受器細胞標誌物視紫紅質.
목적:탐색골수간충질간세포(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)정향분화성광감수기양세포소수적미배경.방법:채용림파세포분리액제도리심법분리순화인BMSCs,배양제3대적세포이감성성섬유세포생장인자(bFGF)、표피생장인자(EGF)급뇌원성신경영양인자(BDNF)3충인자수선진행향신경전체세포유도분화,응용면역세포화학검측소단백급미관상관단백-2,당소단백양성표체솔체도최고시경환유도인자,가입색소상피연생인자(PEDF)급우광산(taurine)계속유도2~3wk,용면역세포화학급RT-PCR법검측시자홍질적표체정황.결과:유도제3d개시능검측도소단백표체,제12d양성표체솔체도최고,체(90.9±2.6)%.미관상관단백-2재유도후제6d검측도양성표체.부분세포형태정신경원세포양.제12d유도인자경환위PEDF급taurine계속유도2~3wk,검측도유시자홍질표체,제2wk양성솔위(20.7±3.8)%,제3wk양성솔위(89.8±3.7)%.결론:채용분계단유도법,응용인자bFGF,GF,DNF급PEDF,aurine능재체외유도BMSCs표체광감수기세포표지물시자홍질.