浙江大学学报（农业与生命科学版）
浙江大學學報（農業與生命科學版）
절강대학학보（농업여생명과학판）
JOURNAL OF ZHEJIANG UNIVERSITY(AGRICULTURE & LIFE SCIENCES)
2011年
6期
591-595
,共5页
崔海瑞%李春楠%孙洁%崔碧珺
崔海瑞%李春楠%孫潔%崔碧珺
최해서%리춘남%손길%최벽군
芹菜CEL Ⅰ核酸酶%品种%器官%发育时期%提取液pH
芹菜CEL Ⅰ覈痠酶%品種%器官%髮育時期%提取液pH
근채CEL Ⅰ핵산매%품충%기관%발육시기%제취액pH
为有效提取芹菜CEL Ⅰ核酸酶和进一步利用它建立点突变检测技术,分析了品种、器官、发育时期和提取液pH值对其提取量的影响,并以含有单个错配的DNA异质双链为底物鉴定其对错配切剖的酶学活性.结果表明:不同芹菜品种和器官间CEL Ⅰ提取量的差异分别达到显著和极显著水平,在比较的3个不同品种(‘雪白’、‘文图拉’和‘泰国黄心芹’)中,以品种‘泰国黄心芹’的CEL Ⅰ提取量最高；而在测定的3种不同器官中,叶片的CEL Ⅰ提取量远远高于茎秆和根；以‘上海黄心芹’为材料比较发育时期对提取量的影响表明,生殖生长期的CEL Ⅰ提取量明显高于营养生长期；缓冲液pH值对CEL Ⅰ提取量也有重要影响,pH 7.5缓冲液的CEL Ⅰ核酸酶提取量高于pH5.5和pH9.5；酶学活性鉴定显示,CEL Ⅰ核酸酶粗提物能有效地识别和切割DNA异质双链中的碱基错配.
為有效提取芹菜CEL Ⅰ覈痠酶和進一步利用它建立點突變檢測技術,分析瞭品種、器官、髮育時期和提取液pH值對其提取量的影響,併以含有單箇錯配的DNA異質雙鏈為底物鑒定其對錯配切剖的酶學活性.結果錶明:不同芹菜品種和器官間CEL Ⅰ提取量的差異分彆達到顯著和極顯著水平,在比較的3箇不同品種(‘雪白’、‘文圖拉’和‘泰國黃心芹’)中,以品種‘泰國黃心芹’的CEL Ⅰ提取量最高；而在測定的3種不同器官中,葉片的CEL Ⅰ提取量遠遠高于莖稈和根；以‘上海黃心芹’為材料比較髮育時期對提取量的影響錶明,生殖生長期的CEL Ⅰ提取量明顯高于營養生長期；緩遲液pH值對CEL Ⅰ提取量也有重要影響,pH 7.5緩遲液的CEL Ⅰ覈痠酶提取量高于pH5.5和pH9.5；酶學活性鑒定顯示,CEL Ⅰ覈痠酶粗提物能有效地識彆和切割DNA異質雙鏈中的堿基錯配.
위유효제취근채CEL Ⅰ핵산매화진일보이용타건립점돌변검측기술,분석료품충、기관、발육시기화제취액pH치대기제취량적영향,병이함유단개착배적DNA이질쌍련위저물감정기대착배절부적매학활성.결과표명:불동근채품충화기관간CEL Ⅰ제취량적차이분별체도현저화겁현저수평,재비교적3개불동품충(‘설백’、‘문도랍’화‘태국황심근’)중,이품충‘태국황심근’적CEL Ⅰ제취량최고；이재측정적3충불동기관중,협편적CEL Ⅰ제취량원원고우경간화근；이‘상해황심근’위재료비교발육시기대제취량적영향표명,생식생장기적CEL Ⅰ제취량명현고우영양생장기；완충액pH치대CEL Ⅰ제취량야유중요영향,pH 7.5완충액적CEL Ⅰ핵산매제취량고우pH5.5화pH9.5；매학활성감정현시,CEL Ⅰ핵산매조제물능유효지식별화절할DNA이질쌍련중적감기착배.
