CAJ | 학술논문

目的:建立检测小鼠脂肪组织中趋化因子CCL20(CC chemokine ligand 20)mRNA的实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,qRT-PCR)的方法.方法:分离小鼠脂肪组织细胞,经PMA和离子霉素刺激4 h后收集细胞提取总RNA并逆转录为cDNA.采用qRT-PCR方法检测趋化因子CCL20 mRNA的表达水平.评价该方法的特异性,同时应用该方法检测小鼠脂肪组织中趋化因子CCL20mRNA相对表达水平.结果:建立了小鼠脂肪组织中趋化因子CCL20的SYBR Green 实时荧光定量PCR检测方法,结果显示该方法的熔解曲线为单峰,同时核酸电泳显示一条特异性条带.检测结果表明高脂饮食诱导的肥胖小鼠脂肪组织中趋化因子CCL20的相对表达水平明显高于正常饮食对照组(t=3.02,P＜0.05).结论:建立了检测小鼠脂肪组织中趋化因子CCL20 mRNA的实时荧光定量PCR方法,特异性好、灵敏性强,为进一步研究小鼠CCL20的生物学功能提供了实验基础.
목적:건립검측소서지방조직중추화인자CCL20(CC chemokine ligand 20)mRNA적실시형광정량PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,qRT-PCR)적방법.방법:분리소서지방조직세포,경PMA화리자매소자격4 h후수집세포제취총RNA병역전록위cDNA.채용qRT-PCR방법검측추화인자CCL20 mRNA적표체수평.평개해방법적특이성,동시응용해방법검측소서지방조직중추화인자CCL20mRNA상대표체수평.결과:건립료소서지방조직중추화인자CCL20적SYBR Green 실시형광정량PCR검측방법,결과현시해방법적용해곡선위단봉,동시핵산전영현시일조특이성조대.검측결과표명고지음식유도적비반소서지방조직중추화인자CCL20적상대표체수평명현고우정상음식대조조(t=3.02,P＜0.05).결론:건립료검측소서지방조직중추화인자CCL20 mRNA적실시형광정량PCR방법,특이성호、령민성강,위진일보연구소서CCL20적생물학공능제공료실험기출.