林业科学研究
林業科學研究
임업과학연구
FOREST RESEARCH
2012年
4期
492-499
,共8页
林琳%李健%李慧玉%穆怀志%姜静
林琳%李健%李慧玉%穆懷誌%薑靜
림림%리건%리혜옥%목부지%강정
刚毛柽柳%脂质转移蛋白%抗旱耐盐性%表达分析
剛毛檉柳%脂質轉移蛋白%抗旱耐鹽性%錶達分析
강모정류%지질전이단백%항한내염성%표체분석
从以刚毛柽柳为材料构建的NaCl胁迫的根cDNA文库中测序得到1条LTP基因序列,其全长为635 bp、编码116个氨基酸,命名为ThLTP基因.采用实时荧光定量RT-PCR的方法,分别对0.2 mol·L-1 NaC1、150 μmol·L-1CdCl2 、20%(W/V)PEG6000、100 μmol·L-1 ABA及4℃下ThLTP基因在柽柳中的表达模式进行了分析,结果表明:ThLTP基因除了在4℃条件下根组织中为下调表达外,在其它处理中均表现为上调表达.将ThLTP基因克隆到大肠杆菌(Escherichia coli的原核表达载体pET32a中,对重组菌Escherichia coli BL21(pET32a-LTP)的抗旱耐盐性进行分析.结果表明:在0.8%(W/V)NaC1和20%(W/V)PEG6000条件下,对照菌E.coli BI21(pET32a)无对数生长期,而重组菌E.colii BL21(pET32a-LTP)经过3h的延迟生长后,进入到对数增长期,表明ThLTP可受盐、碱、低温诱导并能提高重组菌的抗旱耐盐能力.
從以剛毛檉柳為材料構建的NaCl脅迫的根cDNA文庫中測序得到1條LTP基因序列,其全長為635 bp、編碼116箇氨基痠,命名為ThLTP基因.採用實時熒光定量RT-PCR的方法,分彆對0.2 mol·L-1 NaC1、150 μmol·L-1CdCl2 、20%(W/V)PEG6000、100 μmol·L-1 ABA及4℃下ThLTP基因在檉柳中的錶達模式進行瞭分析,結果錶明:ThLTP基因除瞭在4℃條件下根組織中為下調錶達外,在其它處理中均錶現為上調錶達.將ThLTP基因剋隆到大腸桿菌(Escherichia coli的原覈錶達載體pET32a中,對重組菌Escherichia coli BL21(pET32a-LTP)的抗旱耐鹽性進行分析.結果錶明:在0.8%(W/V)NaC1和20%(W/V)PEG6000條件下,對照菌E.coli BI21(pET32a)無對數生長期,而重組菌E.colii BL21(pET32a-LTP)經過3h的延遲生長後,進入到對數增長期,錶明ThLTP可受鹽、堿、低溫誘導併能提高重組菌的抗旱耐鹽能力.
종이강모정류위재료구건적NaCl협박적근cDNA문고중측서득도1조LTP기인서렬,기전장위635 bp、편마116개안기산,명명위ThLTP기인.채용실시형광정량RT-PCR적방법,분별대0.2 mol·L-1 NaC1、150 μmol·L-1CdCl2 、20%(W/V)PEG6000、100 μmol·L-1 ABA급4℃하ThLTP기인재정류중적표체모식진행료분석,결과표명:ThLTP기인제료재4℃조건하근조직중위하조표체외,재기타처리중균표현위상조표체.장ThLTP기인극륭도대장간균(Escherichia coli적원핵표체재체pET32a중,대중조균Escherichia coli BL21(pET32a-LTP)적항한내염성진행분석.결과표명:재0.8%(W/V)NaC1화20%(W/V)PEG6000조건하,대조균E.coli BI21(pET32a)무대수생장기,이중조균E.colii BL21(pET32a-LTP)경과3h적연지생장후,진입도대수증장기,표명ThLTP가수염、감、저온유도병능제고중조균적항한내염능력.