CAJ | 학술논문

目的研究临床分离的一株大肠埃希菌中衰减子基因突变对头孢菌素酶(AmpC)基因表达以及耐药表型的影响.方法用三维试验、等电聚焦、酶抑制试验以及微量稀释法等对临床分离的一株大肠埃希菌进行表型检测.采用聚合酶链反应(PCR)、基因测序以及比对等方法对调节基因进行扩增、分析,并把调节基因克隆到pCAT3-basic(无启动子的报告基因载体)上,用酶联免疫法(直接法)和最小抑菌浓度测定(间接法)等方法对基因表达进行研究.结果与标准菌株大肠埃希菌K-12 AmpC基因相比,受试菌的衰减子区出现了4个碱基22C-T,26、27TA-GT,32G-A的替换.该株菌三维试验阳性,等电聚焦以及酶抑制试验表明该菌株能产3种等电点(PI),分别为5.4、8.2及9.0的β-内酰胺酶,等电点为9.0的β-内酰胺酶能够被氯唑西林抑制而不能被克拉维酸抑制.微量稀释法检测表明,该菌株不但对多种三代头孢菌素耐药,而且对头孢吡肟耐药,但对碳青霉烯类抗生素仍敏感.把它的AmpC调节基因成功地克隆到报告基因载体pCAT3-basic中,直接和间接检测表明突变的调节基因表达CAT蛋白的水平比敏感菌株调节基因高约10倍.结论大肠埃希菌衰减子突变能够导致AmpC基因高表达而对多种β-内酰胺类抗生素表现耐药.
목적연구림상분리적일주대장애희균중쇠감자기인돌변대두포균소매(AmpC)기인표체이급내약표형적영향.방법용삼유시험、등전취초、매억제시험이급미량희석법등대림상분리적일주대장애희균진행표형검측.채용취합매련반응(PCR)、기인측서이급비대등방법대조절기인진행확증、분석,병파조절기인극륭도pCAT3-basic(무계동자적보고기인재체)상,용매련면역법(직접법)화최소억균농도측정(간접법)등방법대기인표체진행연구.결과여표준균주대장애희균K-12 AmpC기인상비,수시균적쇠감자구출현료4개감기22C-T,26、27TA-GT,32G-A적체환.해주균삼유시험양성,등전취초이급매억제시험표명해균주능산3충등전점(PI),분별위5.4、8.2급9.0적β-내선알매,등전점위9.0적β-내선알매능구피록서서림억제이불능피극랍유산억제.미량희석법검측표명,해균주불단대다충삼대두포균소내약,이차대두포필우내약,단대탄청매희류항생소잉민감.파타적AmpC조절기인성공지극륭도보고기인재체pCAT3-basic중,직접화간접검측표명돌변적조절기인표체CAT단백적수평비민감균주조절기인고약10배.결론대장애희균쇠감자돌변능구도치AmpC기인고표체이대다충β-내선알류항생소표현내약.