中华实验和临床病毒学杂志
中華實驗和臨床病毒學雜誌
중화실험화림상병독학잡지
CHINESE JOURNAL OF EXPERIMENTAL AND CLINICAL VIROLOGY
2002年
3期
249-252
,共4页
马本江%杭长寿%赵云%王世文%解燕乡
馬本江%杭長壽%趙雲%王世文%解燕鄉
마본강%항장수%조운%왕세문%해연향
新型杆状病毒表达载体%出血热病毒,克里米亚-刚果%核蛋白类基因表达调控病毒
新型桿狀病毒錶達載體%齣血熱病毒,剋裏米亞-剛果%覈蛋白類基因錶達調控病毒
신형간상병독표체재체%출혈열병독,극리미아-강과%핵단백류기인표체조공병독
目的构建可以在哺乳动物细胞中高效表达的新型杆状病毒载体,并利用其将克里米亚-刚果出血热病毒(CCHFV)中国分离株(新疆出血热病毒,XHFV)BA88166的核蛋白(NP)基因在昆虫和哺乳动物细胞中进行表达.方法将人巨细胞病毒(CMV)立即早期(IE)启动子连接至杆状病毒载体pFastBac1多角体启动子下游形成新载体pCB1,然后将XHFV NP基因克隆至该载体,通过重组质粒转染和病毒感染,检测其在哺乳动物细胞(COS-7和Vero)及昆虫细胞中的表达.结果连接至pCB1的XHFV NP基因均能在相应的细胞中获得良好表达;以重组杆状病毒感染的Vero细胞可以作为抗原检测XHF血清,与ELISA的检测结果完全一致,并与临床诊断有很好的平行性.结论新型杆状病毒载体能够驱动外源基因在昆虫和哺乳动物细胞中高效表达,不仅能方便快速地制备诊断抗原,还具有发展重组病毒疫苗和基因治疗的潜力.
目的構建可以在哺乳動物細胞中高效錶達的新型桿狀病毒載體,併利用其將剋裏米亞-剛果齣血熱病毒(CCHFV)中國分離株(新疆齣血熱病毒,XHFV)BA88166的覈蛋白(NP)基因在昆蟲和哺乳動物細胞中進行錶達.方法將人巨細胞病毒(CMV)立即早期(IE)啟動子連接至桿狀病毒載體pFastBac1多角體啟動子下遊形成新載體pCB1,然後將XHFV NP基因剋隆至該載體,通過重組質粒轉染和病毒感染,檢測其在哺乳動物細胞(COS-7和Vero)及昆蟲細胞中的錶達.結果連接至pCB1的XHFV NP基因均能在相應的細胞中穫得良好錶達;以重組桿狀病毒感染的Vero細胞可以作為抗原檢測XHF血清,與ELISA的檢測結果完全一緻,併與臨床診斷有很好的平行性.結論新型桿狀病毒載體能夠驅動外源基因在昆蟲和哺乳動物細胞中高效錶達,不僅能方便快速地製備診斷抗原,還具有髮展重組病毒疫苗和基因治療的潛力.
목적구건가이재포유동물세포중고효표체적신형간상병독재체,병이용기장극리미아-강과출혈열병독(CCHFV)중국분리주(신강출혈열병독,XHFV)BA88166적핵단백(NP)기인재곤충화포유동물세포중진행표체.방법장인거세포병독(CMV)립즉조기(IE)계동자련접지간상병독재체pFastBac1다각체계동자하유형성신재체pCB1,연후장XHFV NP기인극륭지해재체,통과중조질립전염화병독감염,검측기재포유동물세포(COS-7화Vero)급곤충세포중적표체.결과련접지pCB1적XHFV NP기인균능재상응적세포중획득량호표체;이중조간상병독감염적Vero세포가이작위항원검측XHF혈청,여ELISA적검측결과완전일치,병여림상진단유흔호적평행성.결론신형간상병독재체능구구동외원기인재곤충화포유동물세포중고효표체,불부능방편쾌속지제비진단항원,환구유발전중조병독역묘화기인치료적잠력.
