中华口腔医学杂志
中華口腔醫學雜誌
중화구강의학잡지
Chinese Journal of Stomatology
2005年
2期
150-153
,共4页
李志勇%刘磊%田卫东%陈希哲%阎征斌%林云锋
李誌勇%劉磊%田衛東%陳希哲%閻徵斌%林雲鋒
리지용%류뢰%전위동%진희철%염정빈%림운봉
干细胞%荧光抗体技术%转染%细胞分化
榦細胞%熒光抗體技術%轉染%細胞分化
간세포%형광항체기술%전염%세포분화
目的体外研究绿色荧光蛋白(GFP)基因转染骨髓间充质干细胞(MSCs)的方法,并检测基因转染后细胞的生物学特性及分化潜能.方法体外分离培养大鼠MSCs,用重组GFP的腺病毒载体Ad-GFP及脂质体介导质粒pEGFP-C1两种方法转染GFP,流式细胞术观察比较基因转染和表达结果;将腺病毒介导的基因转染细胞经成骨定向诱导后,检测碱性磷酸酶表达和钙结节形成情况. 结果重组Ad-GFP对细胞的感染率达(41.3±1.4)%,感染6周后仍有表达;脂质体组转染效率最高为12.5%.病毒感染组阳性细胞与未感染组细胞经成骨诱导分化后碱性磷酸酶表达均逐渐增高;诱导3周后茜素红钙盐染色均为阳性.结论重组GFP的腺病毒载体Ad-GFP可高效感染MSCs,基因转染后细胞的增殖分化能力与未转染细胞差异无统计学意义(P＞0.05),可以作为一种高效的大鼠MSCs的标记方法.
目的體外研究綠色熒光蛋白(GFP)基因轉染骨髓間充質榦細胞(MSCs)的方法,併檢測基因轉染後細胞的生物學特性及分化潛能.方法體外分離培養大鼠MSCs,用重組GFP的腺病毒載體Ad-GFP及脂質體介導質粒pEGFP-C1兩種方法轉染GFP,流式細胞術觀察比較基因轉染和錶達結果;將腺病毒介導的基因轉染細胞經成骨定嚮誘導後,檢測堿性燐痠酶錶達和鈣結節形成情況. 結果重組Ad-GFP對細胞的感染率達(41.3±1.4)%,感染6週後仍有錶達;脂質體組轉染效率最高為12.5%.病毒感染組暘性細胞與未感染組細胞經成骨誘導分化後堿性燐痠酶錶達均逐漸增高;誘導3週後茜素紅鈣鹽染色均為暘性.結論重組GFP的腺病毒載體Ad-GFP可高效感染MSCs,基因轉染後細胞的增殖分化能力與未轉染細胞差異無統計學意義(P＞0.05),可以作為一種高效的大鼠MSCs的標記方法.
목적체외연구록색형광단백(GFP)기인전염골수간충질간세포(MSCs)적방법,병검측기인전염후세포적생물학특성급분화잠능.방법체외분리배양대서MSCs,용중조GFP적선병독재체Ad-GFP급지질체개도질립pEGFP-C1량충방법전염GFP,류식세포술관찰비교기인전염화표체결과;장선병독개도적기인전염세포경성골정향유도후,검측감성린산매표체화개결절형성정황. 결과중조Ad-GFP대세포적감염솔체(41.3±1.4)%,감염6주후잉유표체;지질체조전염효솔최고위12.5%.병독감염조양성세포여미감염조세포경성골유도분화후감성린산매표체균축점증고;유도3주후천소홍개염염색균위양성.결론중조GFP적선병독재체Ad-GFP가고효감염MSCs,기인전염후세포적증식분화능력여미전염세포차이무통계학의의(P＞0.05),가이작위일충고효적대서MSCs적표기방법.
