神经损伤与功能重建
神經損傷與功能重建
신경손상여공능중건
NEURAL INJURY AND FUNCTIONAL RECONSTRUCTION
2012年
4期
238-240,262
,共4页
mInscuteable%GST%融合蛋白%原核表达%蛋白纯化
mInscuteable%GST%融閤蛋白%原覈錶達%蛋白純化
mInscuteable%GST%융합단백%원핵표체%단백순화
目的:构建哺乳动物极性蛋白mInscuteable C末端257～532位氨基酸结构域与谷胱甘肽巯基转移酶(GST)的融合蛋白GST-mInsc 257～532的原核表达载体,在大肠杆菌中表达并纯化该融合蛋白.方法:将已经构建好的mInsc 257～532位氨基酸序列克隆至原核表达载体pGEX-4T中,构建重组的质粒pGEX-4T/mInsc 257～532；将重组质粒转化感受态细菌BL21,异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达GST蛋白；经谷胱甘肽-琼脂糖球珠分离纯化；产物经SDS-PAGE电泳及Western Blot鉴定.结果:获得高表达及纯化的pGEX-4T/mInsc 257～532融合蛋白.结论:成功构建重组pGEX-4T/mInsc 257～532原核表达载体；诱导表达pGEX-4T/mInsc 257～532融合蛋白并纯化.
目的:構建哺乳動物極性蛋白mInscuteable C末耑257～532位氨基痠結構域與穀胱甘肽巰基轉移酶(GST)的融閤蛋白GST-mInsc 257～532的原覈錶達載體,在大腸桿菌中錶達併純化該融閤蛋白.方法:將已經構建好的mInsc 257～532位氨基痠序列剋隆至原覈錶達載體pGEX-4T中,構建重組的質粒pGEX-4T/mInsc 257～532；將重組質粒轉化感受態細菌BL21,異丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)誘導錶達GST蛋白；經穀胱甘肽-瓊脂糖毬珠分離純化；產物經SDS-PAGE電泳及Western Blot鑒定.結果:穫得高錶達及純化的pGEX-4T/mInsc 257～532融閤蛋白.結論:成功構建重組pGEX-4T/mInsc 257～532原覈錶達載體；誘導錶達pGEX-4T/mInsc 257～532融閤蛋白併純化.
목적:구건포유동물겁성단백mInscuteable C말단257～532위안기산결구역여곡광감태구기전이매(GST)적융합단백GST-mInsc 257～532적원핵표체재체,재대장간균중표체병순화해융합단백.방법:장이경구건호적mInsc 257～532위안기산서렬극륭지원핵표체재체pGEX-4T중,구건중조적질립pGEX-4T/mInsc 257～532；장중조질립전화감수태세균BL21,이병기-β-D-류대필남반유당감(IPTG)유도표체GST단백；경곡광감태-경지당구주분리순화；산물경SDS-PAGE전영급Western Blot감정.결과:획득고표체급순화적pGEX-4T/mInsc 257～532융합단백.결론:성공구건중조pGEX-4T/mInsc 257～532원핵표체재체；유도표체pGEX-4T/mInsc 257～532융합단백병순화.
