中国草食动物
中國草食動物
중국초식동물
CHINA HERBIVORES
2010年
z1期
218-219
,共2页
朱江江%罗军%赵旺生%王伟%石恒波%李君
硃江江%囉軍%趙旺生%王偉%石恆波%李君
주강강%라군%조왕생%왕위%석항파%리군
脂肪酸合酶%乙酰/丙二酸单酰基转移酶%腺病毒载体
脂肪痠閤酶%乙酰/丙二痠單酰基轉移酶%腺病毒載體
지방산합매%을선/병이산단선기전이매%선병독재체
研究旨在通过构建西农萨能羊脂肪酸合酶(FAS)基因乙酰/丙二酸单酰基转移酶(MAT)区域的重组腺病毒载体,为下一步其在奶山羊乳腺上皮细胞中过表达,进一步研究MAT的功能和作用机制做准备.根据GeneBank收录的西农萨能羊MAT序列设计引物,PCR扩增并克隆测序.连接到穿梭载体pAdTrack/CMV上并线性化后,转化含有腺病毒骨架载体pAdEasy1的E.Coli Bj5183感受态细胞进行同源重组,并用Pac Ⅰ酶切鉴定.提取质粒后转化E.coli Top10进行扩繁.将本次克隆的MAT序列与GeneBank收录的序列相比对,在601 bp处,碱基由G转变为A,导致氨基酸序列由从201转变为Thr201.经鉴定并测序分析,试验成功构建MAT基因的重组腺病毒表达载体,可用于下一步病毒包装.
研究旨在通過構建西農薩能羊脂肪痠閤酶(FAS)基因乙酰/丙二痠單酰基轉移酶(MAT)區域的重組腺病毒載體,為下一步其在奶山羊乳腺上皮細胞中過錶達,進一步研究MAT的功能和作用機製做準備.根據GeneBank收錄的西農薩能羊MAT序列設計引物,PCR擴增併剋隆測序.連接到穿梭載體pAdTrack/CMV上併線性化後,轉化含有腺病毒骨架載體pAdEasy1的E.Coli Bj5183感受態細胞進行同源重組,併用Pac Ⅰ酶切鑒定.提取質粒後轉化E.coli Top10進行擴繁.將本次剋隆的MAT序列與GeneBank收錄的序列相比對,在601 bp處,堿基由G轉變為A,導緻氨基痠序列由從201轉變為Thr201.經鑒定併測序分析,試驗成功構建MAT基因的重組腺病毒錶達載體,可用于下一步病毒包裝.
연구지재통과구건서농살능양지방산합매(FAS)기인을선/병이산단선기전이매(MAT)구역적중조선병독재체,위하일보기재내산양유선상피세포중과표체,진일보연구MAT적공능화작용궤제주준비.근거GeneBank수록적서농살능양MAT서렬설계인물,PCR확증병극륭측서.련접도천사재체pAdTrack/CMV상병선성화후,전화함유선병독골가재체pAdEasy1적E.Coli Bj5183감수태세포진행동원중조,병용Pac Ⅰ매절감정.제취질립후전화E.coli Top10진행확번.장본차극륭적MAT서렬여GeneBank수록적서렬상비대,재601 bp처,감기유G전변위A,도치안기산서렬유종201전변위Thr201.경감정병측서분석,시험성공구건MAT기인적중조선병독표체재체,가용우하일보병독포장.
