福建医药杂志
福建醫藥雜誌
복건의약잡지
FUJIAN MEDICAL JOURNAL
2010年
4期
63-65
,共3页
人乳腺珠蛋白%亲脂素B%乳腺癌%基因表达调控%肿瘤
人乳腺珠蛋白%親脂素B%乳腺癌%基因錶達調控%腫瘤
인유선주단백%친지소B%유선암%기인표체조공%종류
目的 构建人乳腺珠蛋白(Mammaglobin A)和亲脂素B(Lipophilin B)真核表达载体,建立稳定高表达Mammaglobin A和同时稳定高表达Mammaglobin A和Lipophilin B的人乳腺癌T47-D细胞系.方法通过RT-PCR的方法从人乳腺癌细胞系MDA-MB-415中扩增Mammaglobin A和Lipophilin B基因,构建真核表达载体pc-MA、pc-LP,分别独立及共转染T47-D细胞,G418筛选阳性克隆,并利用RT-PCR、Western Blot鉴定.结果重组质粒pc-MA、pc-LP酶切图谱、序列分析证明pc-MA、pc-LP载体构建成功,目的 基因序列与GenBank中的序列完全一致.RT-PCR与Western Blot结果证实,独立稳定高表达Mammaglobin A和同时稳定高表达Mammaglobin A和Lipophilin B的人乳腺癌细胞系建立成功.结论成功建立独立高表达MammaglobinA和同时高表达Mammaglobin A和Lipophilin B的乳腺癌细胞系,为探讨Mammaglobin A和Lipophilin B在乳腺癌发生发展中的作用提供了实验基础.
目的 構建人乳腺珠蛋白(Mammaglobin A)和親脂素B(Lipophilin B)真覈錶達載體,建立穩定高錶達Mammaglobin A和同時穩定高錶達Mammaglobin A和Lipophilin B的人乳腺癌T47-D細胞繫.方法通過RT-PCR的方法從人乳腺癌細胞繫MDA-MB-415中擴增Mammaglobin A和Lipophilin B基因,構建真覈錶達載體pc-MA、pc-LP,分彆獨立及共轉染T47-D細胞,G418篩選暘性剋隆,併利用RT-PCR、Western Blot鑒定.結果重組質粒pc-MA、pc-LP酶切圖譜、序列分析證明pc-MA、pc-LP載體構建成功,目的 基因序列與GenBank中的序列完全一緻.RT-PCR與Western Blot結果證實,獨立穩定高錶達Mammaglobin A和同時穩定高錶達Mammaglobin A和Lipophilin B的人乳腺癌細胞繫建立成功.結論成功建立獨立高錶達MammaglobinA和同時高錶達Mammaglobin A和Lipophilin B的乳腺癌細胞繫,為探討Mammaglobin A和Lipophilin B在乳腺癌髮生髮展中的作用提供瞭實驗基礎.
목적 구건인유선주단백(Mammaglobin A)화친지소B(Lipophilin B)진핵표체재체,건립은정고표체Mammaglobin A화동시은정고표체Mammaglobin A화Lipophilin B적인유선암T47-D세포계.방법통과RT-PCR적방법종인유선암세포계MDA-MB-415중확증Mammaglobin A화Lipophilin B기인,구건진핵표체재체pc-MA、pc-LP,분별독립급공전염T47-D세포,G418사선양성극륭,병이용RT-PCR、Western Blot감정.결과중조질립pc-MA、pc-LP매절도보、서렬분석증명pc-MA、pc-LP재체구건성공,목적 기인서렬여GenBank중적서렬완전일치.RT-PCR여Western Blot결과증실,독립은정고표체Mammaglobin A화동시은정고표체Mammaglobin A화Lipophilin B적인유선암세포계건립성공.결론성공건립독립고표체MammaglobinA화동시고표체Mammaglobin A화Lipophilin B적유선암세포계,위탐토Mammaglobin A화Lipophilin B재유선암발생발전중적작용제공료실험기출.
