中国微循环
中國微循環
중국미순배
JOURNAL OF CHINESE MICROCIRCULATION
2009年
6期
469-474
,共6页
李东野%王静%夏勇%罗园媛%陈丹%潘德锋%朱红%宋建涛%徐通达
李東野%王靜%夏勇%囉園媛%陳丹%潘德鋒%硃紅%宋建濤%徐通達
리동야%왕정%하용%라완원%진단%반덕봉%주홍%송건도%서통체
Akt-1%心肌再灌注损伤%基因%细胞凋亡
Akt-1%心肌再灌註損傷%基因%細胞凋亡
Akt-1%심기재관주손상%기인%세포조망
目的 通过观察转染Akt-1基因对大鼠心肌缺血-再灌注(I-R)损伤心脏功能及细胞凋亡相关蛋白的影响,探讨Akt-1基因对心肌I-R损伤保护作用的机制.方法 使用结扎/松解左冠状动脉前降支法,结扎冠状动脉前降支30 min,再灌注2 h,建立大鼠在体心肌I-R模型.40只雄性SD大鼠随机分为五组:假手术组(S组),缺血-再灌注组(I-R组),转染Akt-1基因组(Gene组),空载体组(VC组),抑制剂组(AB组),每组8只.Gene组术前48 h开胸心肌内直接分点注射脂质体Akt-1质粒复合物,S组和I-R组分别注射同等体积PBS,VC组注射等体积脂质体,AB组注射等体积脂质体Akt-1质粒LY294002混合物.所有大鼠经颈动脉插管至左心室记录HR、LVSP、LVEDP和±dp/dtmax变化,TTC染色法测定心肌梗死范围,TUNEL法原位标记凋亡心肌细胞, Western Blot测定Akt-1、Casepase-3蛋白表达,免疫组化检测Bcl-2、Bax表达.结果 1. Gene组较I-R组、VC组和AB组左室心功能(HR、LVSP、LVEDP、±dp/dtmax)改善(P<0.05).2. Gene组凋亡指数(AI)及心肌梗死范围较I-R组、VC组及AB组均显著减少(P<0.05),但仍高于S组(P<0.05);S组细胞凋亡阳性细胞几无表达,心肌细胞凋亡指数(AI)明显低于其余各组(P<0.05).3.各组均可见Akt-1、Casepase-3蛋白表达,但S组中蛋白较其余各组减少(P<0.05);Gene组Akt-1蛋白表达较I-R组、VC组及AB组均增加(P<0.05);Gene组Casepase-3蛋白表达则较I-R组、VC组及AB组减少.4. S组Bcl-2和Bax表达较其余各组减少(P<0.05);Gene组较I-R组、VC组及AB组Bcl-2表达上调而Bax表达下调(P<0.05).结论 Akt-1基因转染对I-R心肌具有保护作用,该作用可能与促进Bcl-2表达,抑制Bax和Casepase-3表达从而抑制凋亡的发生有关.
目的 通過觀察轉染Akt-1基因對大鼠心肌缺血-再灌註(I-R)損傷心髒功能及細胞凋亡相關蛋白的影響,探討Akt-1基因對心肌I-R損傷保護作用的機製.方法 使用結扎/鬆解左冠狀動脈前降支法,結扎冠狀動脈前降支30 min,再灌註2 h,建立大鼠在體心肌I-R模型.40隻雄性SD大鼠隨機分為五組:假手術組(S組),缺血-再灌註組(I-R組),轉染Akt-1基因組(Gene組),空載體組(VC組),抑製劑組(AB組),每組8隻.Gene組術前48 h開胸心肌內直接分點註射脂質體Akt-1質粒複閤物,S組和I-R組分彆註射同等體積PBS,VC組註射等體積脂質體,AB組註射等體積脂質體Akt-1質粒LY294002混閤物.所有大鼠經頸動脈插管至左心室記錄HR、LVSP、LVEDP和±dp/dtmax變化,TTC染色法測定心肌梗死範圍,TUNEL法原位標記凋亡心肌細胞, Western Blot測定Akt-1、Casepase-3蛋白錶達,免疫組化檢測Bcl-2、Bax錶達.結果 1. Gene組較I-R組、VC組和AB組左室心功能(HR、LVSP、LVEDP、±dp/dtmax)改善(P<0.05).2. Gene組凋亡指數(AI)及心肌梗死範圍較I-R組、VC組及AB組均顯著減少(P<0.05),但仍高于S組(P<0.05);S組細胞凋亡暘性細胞幾無錶達,心肌細胞凋亡指數(AI)明顯低于其餘各組(P<0.05).3.各組均可見Akt-1、Casepase-3蛋白錶達,但S組中蛋白較其餘各組減少(P<0.05);Gene組Akt-1蛋白錶達較I-R組、VC組及AB組均增加(P<0.05);Gene組Casepase-3蛋白錶達則較I-R組、VC組及AB組減少.4. S組Bcl-2和Bax錶達較其餘各組減少(P<0.05);Gene組較I-R組、VC組及AB組Bcl-2錶達上調而Bax錶達下調(P<0.05).結論 Akt-1基因轉染對I-R心肌具有保護作用,該作用可能與促進Bcl-2錶達,抑製Bax和Casepase-3錶達從而抑製凋亡的髮生有關.
목적 통과관찰전염Akt-1기인대대서심기결혈-재관주(I-R)손상심장공능급세포조망상관단백적영향,탐토Akt-1기인대심기I-R손상보호작용적궤제.방법 사용결찰/송해좌관상동맥전강지법,결찰관상동맥전강지30 min,재관주2 h,건립대서재체심기I-R모형.40지웅성SD대서수궤분위오조:가수술조(S조),결혈-재관주조(I-R조),전염Akt-1기인조(Gene조),공재체조(VC조),억제제조(AB조),매조8지.Gene조술전48 h개흉심기내직접분점주사지질체Akt-1질립복합물,S조화I-R조분별주사동등체적PBS,VC조주사등체적지질체,AB조주사등체적지질체Akt-1질립LY294002혼합물.소유대서경경동맥삽관지좌심실기록HR、LVSP、LVEDP화±dp/dtmax변화,TTC염색법측정심기경사범위,TUNEL법원위표기조망심기세포, Western Blot측정Akt-1、Casepase-3단백표체,면역조화검측Bcl-2、Bax표체.결과 1. Gene조교I-R조、VC조화AB조좌실심공능(HR、LVSP、LVEDP、±dp/dtmax)개선(P<0.05).2. Gene조조망지수(AI)급심기경사범위교I-R조、VC조급AB조균현저감소(P<0.05),단잉고우S조(P<0.05);S조세포조망양성세포궤무표체,심기세포조망지수(AI)명현저우기여각조(P<0.05).3.각조균가견Akt-1、Casepase-3단백표체,단S조중단백교기여각조감소(P<0.05);Gene조Akt-1단백표체교I-R조、VC조급AB조균증가(P<0.05);Gene조Casepase-3단백표체칙교I-R조、VC조급AB조감소.4. S조Bcl-2화Bax표체교기여각조감소(P<0.05);Gene조교I-R조、VC조급AB조Bcl-2표체상조이Bax표체하조(P<0.05).결론 Akt-1기인전염대I-R심기구유보호작용,해작용가능여촉진Bcl-2표체,억제Bax화Casepase-3표체종이억제조망적발생유관.
