中国法医学杂志
中國法醫學雜誌
중국법의학잡지
CHINESE JOURNAL OF FORENSIC MEDICINE
2008年
6期
366-369
,共4页
曾立波%陈连康%胡小龙%张玉荣%张艳%骆华%张润生%沈思
曾立波%陳連康%鬍小龍%張玉榮%張豔%駱華%張潤生%瀋思
증립파%진련강%호소룡%장옥영%장염%락화%장윤생%침사
法医物证学%丁丙诺啡%杂交瘤%单克隆抗体%免疫学
法醫物證學%丁丙諾啡%雜交瘤%單剋隆抗體%免疫學
법의물증학%정병낙배%잡교류%단극륭항체%면역학
目的 建立抗丁丙诺啡单克隆抗体的杂交瘤细胞株,制备高特异性的丁丙诺啡单克隆抗体,并对其免疫学特性进行鉴定.方法 在丁丙诺啡的分子上连接活性羧基基团,通过缩合反应将丁丙诺啡半抗原连接于血蓝蛋白(KLH)和小牛血}苛白蛋白(BSA),形成完全抗原.以完全抗原免疫Balh/c小鼠,通过细胞融合,筛选等杂交瘤技术,建立稳定的分泌抗丁丙诺啡单克隆抗体的杂交瘤细胞株.通过腹腔注射杂交瘤细胞,诱导小鼠产生含有单抗的腹水.用辛酸·硫酸铵加亲和层析法纯化抗丁丙诺啡单克隆抗体.采用酶联免疫反应和胶体金膜层析实验测定丁丙诺啡单抗的特异性以及免疫反应动力学参数.结果 共获得3株分泌抗丁丙诺啡单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为7E6,6G4和3C2.7E6,6G4抗体灵敏度为10.0ng/ml,3C2抗体灵敏度为20.0ng/ml.7E6,6G4和3C2抗体的亲和常数分别为3.6×10-9mol/L,4.3×10-3mol/L和6.3×10-9mol/L.特异性测试结果表明7E6和6G4抗体与40种药物、毒品无任何交叉反应,而3C2抗体与吗啡有交叉反应.结论 杂交瘤细胞株7E6和6G4产生的抗丁丙诺啡单克隆抗体具有很高的特异性和灵敏度.
目的 建立抗丁丙諾啡單剋隆抗體的雜交瘤細胞株,製備高特異性的丁丙諾啡單剋隆抗體,併對其免疫學特性進行鑒定.方法 在丁丙諾啡的分子上連接活性羧基基糰,通過縮閤反應將丁丙諾啡半抗原連接于血藍蛋白(KLH)和小牛血}苛白蛋白(BSA),形成完全抗原.以完全抗原免疫Balh/c小鼠,通過細胞融閤,篩選等雜交瘤技術,建立穩定的分泌抗丁丙諾啡單剋隆抗體的雜交瘤細胞株.通過腹腔註射雜交瘤細胞,誘導小鼠產生含有單抗的腹水.用辛痠·硫痠銨加親和層析法純化抗丁丙諾啡單剋隆抗體.採用酶聯免疫反應和膠體金膜層析實驗測定丁丙諾啡單抗的特異性以及免疫反應動力學參數.結果 共穫得3株分泌抗丁丙諾啡單剋隆抗體的雜交瘤細胞株,分彆命名為7E6,6G4和3C2.7E6,6G4抗體靈敏度為10.0ng/ml,3C2抗體靈敏度為20.0ng/ml.7E6,6G4和3C2抗體的親和常數分彆為3.6×10-9mol/L,4.3×10-3mol/L和6.3×10-9mol/L.特異性測試結果錶明7E6和6G4抗體與40種藥物、毒品無任何交扠反應,而3C2抗體與嗎啡有交扠反應.結論 雜交瘤細胞株7E6和6G4產生的抗丁丙諾啡單剋隆抗體具有很高的特異性和靈敏度.
목적 건립항정병낙배단극륭항체적잡교류세포주,제비고특이성적정병낙배단극륭항체,병대기면역학특성진행감정.방법 재정병낙배적분자상련접활성최기기단,통과축합반응장정병낙배반항원련접우혈람단백(KLH)화소우혈}가백단백(BSA),형성완전항원.이완전항원면역Balh/c소서,통과세포융합,사선등잡교류기술,건립은정적분비항정병낙배단극륭항체적잡교류세포주.통과복강주사잡교류세포,유도소서산생함유단항적복수.용신산·류산안가친화층석법순화항정병낙배단극륭항체.채용매련면역반응화효체금막층석실험측정정병낙배단항적특이성이급면역반응동역학삼수.결과 공획득3주분비항정병낙배단극륭항체적잡교류세포주,분별명명위7E6,6G4화3C2.7E6,6G4항체령민도위10.0ng/ml,3C2항체령민도위20.0ng/ml.7E6,6G4화3C2항체적친화상수분별위3.6×10-9mol/L,4.3×10-3mol/L화6.3×10-9mol/L.특이성측시결과표명7E6화6G4항체여40충약물、독품무임하교차반응,이3C2항체여마배유교차반응.결론 잡교류세포주7E6화6G4산생적항정병낙배단극륭항체구유흔고적특이성화령민도.
